खाद्य उत्पादों में बेंज़ोपाइरीन का GOST निर्धारण। बेंजो(ए)पाइरीन के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के लिए खाद्य उत्पाद विधियां

प्रमाणपत्र संख्या 30-08 दिनांक 03/04/2008
एफआर.1.31.2008.01033

1. अध्ययन की वस्तुएँ

यह माप प्रक्रिया स्मोक्ड मांस, स्मोक्ड मछली और वसायुक्त उत्पादों पर लागू होती है और फ्लोरीमेट्रिक पहचान के साथ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान एकाग्रता का निर्धारण स्थापित करती है।

2. मापने की सीमा

वसायुक्त, स्मोक्ड मांस और स्मोक्ड मछली उत्पादों में बेंजो (ए) पाइरीन की अधिकतम अनुमेय सांद्रता 1 μg/kg है।

यह विधि तालिका 1 में प्रस्तुत सीमाओं में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता के लिए माप परिणाम प्रदान करती है।

तालिका 1. बेंजो(ए)पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता के लिए माप श्रेणियां

उत्पाद का प्रकार	मास रेंज सांद्रता, μg/किग्रा	एमपीसी, माइक्रोग्राम/किग्रा
वसायुक्त उत्पाद	0,5 – 2,0	1,0
स्मोक्ड मांस उत्पाद	0,5 – 2,0	1,0
स्मोक्ड मछली उत्पाद	0,5 – 2,0	1,0

3. नमूना तैयार करना

उत्पाद के नमूनों का चयन, संरक्षण और भंडारण GOST 7631, GOST 9792, TU और विशिष्ट प्रकार के उत्पादों के लिए नमूने को विनियमित करने वाले अन्य नियामक दस्तावेज के अनुसार किया जाता है।

नमूना तैयार करने में नमूना संग्रह के चरण शामिल हैं (नमूना 30 मिनट के लिए माइनस 12-18 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पहले से ठंडा किया जाता है), पीसना, निर्जल सोडियम सल्फेट के साथ समरूपीकरण, एक फ्लास्क में हेक्सेन के साथ समरूप नमूना निकालना एक अल्ट्रासोनिक स्नान, एक ठोस तलछट का सहज अवसादन (1-2 मिनट के लिए), फ्रीजर में अर्क को कम करना (सिलिका जेल का एक नमूना सिलेंडर में जोड़ा जाता है, अर्क जोड़ा जाता है, सिलेंडर की सामग्री को अंदर रखा जाता है) फ्रीजर), नॉन-रिटेनिंग सॉलिड-फेज एक्सट्रैक्शन (स्ट्रेटा सिलिका सी-1 कार्ट्रिज पर)* का उपयोग करके सतह पर तैरनेवाला हेक्सेन परत को साफ करना, हवा या अक्रिय गैस की धारा में इलुएट को अलग करना।

*टिप्पणी। यदि प्रारंभिक विश्लेषण किए गए उत्पाद की वसा सांद्रता 5% से कम है, तो जमने के बाद प्रारंभिक नमूना अर्क में थोड़ी मात्रा में रेफरेंस अभिकर्मक - एथिल एसीटेट (0.1 मिली से 6 मिली शुद्ध अर्क) मिलाया जाना चाहिए।

4. क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण करना

4.1. बेंजो(ए)पाइरीन अंशांकन समाधान और तैयार उत्पाद नमूनों के एचपीएलसी विश्लेषण के लिए उपकरण और शर्तें।

बेंजो (ए) पाइरीन के क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण के लिए, फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्शन के साथ एक लोकतांत्रिक उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी प्रणाली का उपयोग किया जाना चाहिए।

विश्लेषण करने के लिए, अंशांकन समाधान पहले हेक्सेन में बेंजो (ए) पाइरीन के जीएसओ समाधान से या एसीटोनिट्राइल में बेंजो (ए) पाइरीन के जीएसओ समाधान से तैयार किया जाता है (विलायक उड़ा दिया जाता है, मानक नमूना हेक्सेन में फिर से घुल जाता है) ); नमूना तैयार करना; संचालन के लिए उपकरण तैयार करें.

उपकरण:

फ्लोरोमेट्रिक डिटेक्टर के साथ तरल क्रोमैटोग्राफ "स्टेयर";

एक पर्सनल कंप्यूटर जिसमें "Windows XP के लिए मल्टीक्रोम" सॉफ़्टवेयर संस्करण 1.5 या 2x स्थापित हो।

लोकतांत्रिक शासन;

स्तंभ: लूना सी18(2) 150x3.0 मिमी 3 µm (फेनोमेनेक्स, यूएसए);

सुरक्षात्मक स्तंभ: C18 4x3.0 मिमी (फेनोमेनेक्स, यूएसए);

मोबाइल चरण: एसीटोनिट्राइल/जल समाधान (75:25);

प्रवाह दर: 0.3 मिली/मिनट;

लूप वॉल्यूम: 10 μl;

तापमान: 50°C;

आरएफयू रेंज: 0.01;

पता लगाना: फ्लोरीमेट्रिक (λex: 365±2 एनएम; λem: 400-460 एनएम)।

हर दो सप्ताह में कम से कम एक बार अंशांकन समाधान (निर्धारित सांद्रता की पूरी श्रृंखला पर) का उपयोग करके अंशांकन किया जाता है, साथ ही अभिकर्मकों के एक नए बैच का उपयोग करते समय, स्तंभों को बदलने और क्रोमैटोग्राफ की मरम्मत के बाद किया जाता है।

4.2. उत्पाद के नमूने में बेंजो(ए)पाइरीन की मात्रात्मक सामग्री का निर्धारण।

उत्पाद नमूने (बेंज़ (ए) पाइरीन) के एक घटक की मात्रात्मक सामग्री निर्धारित करने के लिए, अंशांकन समाधानों में से एक का क्रोमैटोग्राफ़िक विश्लेषण किया जाता है, इसके बाद तैयार नमूने का क्रोमैटोग्राफ़िक विश्लेषण किया जाता है। माप की विश्वसनीयता के लिए, अंशांकन समाधान और तैयार नमूने दोनों का क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण लगातार कम से कम 2 बार किया जाता है।

स्थापित सॉफ़्टवेयर का उपयोग करना - माप के अंत में रिपोर्ट में या शिखर के ऊपर ("व्यू" विकल्पों की सेटिंग्स के आधार पर) "विंडोज़ एक्सपी के लिए मल्टीक्रोम", परिणाम स्वचालित रूप से एकाग्रता के रूप में निर्धारित होता है नमूना क्रोमैटोग्राफ़ में डाला गया (लेकिन शोध के लिए लिए गए मूल नमूने में नहीं!)।

परिणाम प्राप्त करने के लिए, कम से कम दो समानांतर माप (दो क्रोमैटोग्राम प्राप्त करें) करना आवश्यक है। माप के परिणाम को विश्लेषण किए गए नमूने सी एक्सपी, μg/l के सांद्रण में बेंजो(ए)पाइरीन की सामग्री के अंकगणितीय माध्य मान के रूप में लिया जाता है (बेंजो(ए)पाइरीन के द्रव्यमान सांद्रता के दो मूल्यों से गणना की जाती है) विश्लेषण किए गए नमूने सी 1 और सी 2 के सांद्रण में)।
विश्लेषण किए गए नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान अंश (मूल नमूने में) एक्स, µg/kg की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है:

कहाँ:
सी एक्सआर - दो समानांतर मापों में क्रोमैटोग्राफी के परिणामस्वरूप प्राप्त बेंजो (ए) पाइरीन एकाग्रता का औसत मूल्य [एनजी/एमएल];
वि 1 - प्रारंभिक अर्क की मात्रा, वास्तव में प्राथमिक निष्कर्षण (50 मिली) के लिए ली गई हेक्सेन की मात्रा के बराबर;
वि 2 - जमने के लिए ली गई अर्क की मात्रा (मूल का हिस्सा) (30 मिली);
वि 3 - एसपीई (6 मिली) [एमएल] के लिए ली गई अर्क की मात्रा (ठंड के बाद अर्क का हिस्सा);
वी 5 - अंतिम अर्क की मात्रा, जिसका एक भाग क्रोमैटोग्राफ में डाला जाता है (लगभग 3 मिली) [एमएल];
के नमूनाकरण - नमूनाकरण गुणांक, विश्लेषण के लिए लिए गए नमूने के कुल द्रव्यमान से निष्कर्षण के लिए लिए गए उत्पाद नमूने (सोडियम सल्फेट के साथ मिश्रित) के द्रव्यमान के अनुपात को ध्यान में रखते हुए। सभी मामलों में 0.736 के बराबर;
के जमना - जमने के दौरान बेंजो(ए)पाइरीन की हानि का गुणांक। अध्ययन के तहत उत्पादों की सभी श्रेणियों के लिए, यह गुणांक समान है और 0.95 के बराबर है;
के अतिरिक्त 1 - हेक्सेन के साथ प्राथमिक तरल निष्कर्षण का गुणांक। अध्ययन के तहत उत्पादों की सभी श्रेणियों के लिए, यह समान है और 0.95 के बराबर है;
क TFEext.2- बेंजो(ए)पाइरीन के ठोस-चरण निष्कर्षण का गुणांक 0.95 है;
एम एवेन्यू. - विश्लेषण के लिए ली गई मिट्टी या मिट्टी [जी]।

पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन: भौतिक रासायनिक गुण और जैविक प्रभाव। बेंज़ोपाइरीन के निर्धारण के तरीकों की समीक्षा। फ्लोरोसेंट पहचान के साथ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा पानी में बेंज़ोपाइरीन का निर्धारण।

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इस पाठ्यक्रम कार्य में 30 पृष्ठ, 1 खंड, 4 उपखंड, 14 अंक, 6 तालिकाएँ और 9 आंकड़े शामिल हैं। पाठ्यक्रम कार्य के अंत में 14 बिंदुओं वाली संदर्भों की एक सूची है।

मेरे शोध का उद्देश्य बेंजो (ए) पाइरीन, इसके गुण, कैंसरकारी प्रभाव, साथ ही इसके निर्धारण के तरीके हैं। पाठ्यक्रम कार्य मास स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्शन के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी और फ्लोरोसेंट डिटेक्शन के साथ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी जैसे तरीकों को प्रस्तुत करता है। इसके अलावा, बेंजो (ए) पाइरीन के विश्लेषणात्मक संकेत को रिकॉर्ड करने के लिए उपयुक्त डिटेक्टरों पर विचार किया गया और एक विशेष डिटेक्टर का उपयोग करने की तर्कसंगतता को प्रमाणित किया गया।

पाठ्यक्रम कार्य पानी में बेंजो (ए) पाइरीन का निर्धारण करने के तरीकों को भी प्रस्तुत करता है, जिसमें नमूना तैयार करना, क्रोमैटोग्राफ अंशांकन, डेटा विश्लेषण और रिकॉर्डिंग शामिल है। कार्य इन विधियों का उपयोग करके प्राप्त क्रोमैटोग्राम प्रस्तुत करता है।

मुख्य शब्द: पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन, बेंज (ए) पाइरीन, उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी, गैस क्रोमैटोग्राफी, फ्लोरिस डिटेक्शन।

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सेल्टा ने मोएटो पर बेंजो(ए)पाइरीन, नेगोविट गुण, कैंसरकारी प्रभाव पर शोध किया और इसके लिए किसी तरह विधि निर्धारित की गई है। पाठ्यक्रम कार्य में द्रव्यमान वर्णक्रमीय वक्र के साथ कैथोगैस क्रोमैटोग्राफी और फ्लोरोसेंट वक्र के साथ अत्यधिक प्रभावी प्रवाह क्रोमैटोग्राफी के तरीके शामिल हैं। इस प्रकार, डिटेक्टरों को बेंजो (ए) पाइरीन से विश्लेषणात्मक रूप से सिग्नल प्राप्त करने के लिए उपयुक्त माना जाता है और डिटेक्टर पर उनके उपयोग को उचित माना जाता है।

इसलिए, बेसिनों पर काम के दौरान, हम पानी में बेंजो (ए) पाइरीन का निर्धारण करने के तरीके प्रस्तुत करते हैं, जिसमें प्रोबिट पर तैयारी, क्रोमैटोग्राफ पर अंशांकन, डेटा पर विश्लेषण और पंजीकरण शामिल है। चार्टर, कार्यप्रणाली की थीसिस के अनुसार प्राप्त आंकड़ों को प्रस्तुत करता है।

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मेरे शोध का विषय बेंजो (ए) पाइरीन, इसकी शक्तिशाली, कार्सिनोजेनिक गतिविधि, साथ ही इसकी पहचान के तरीके हैं। पाठ्यक्रम कार्य बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोस्कोपिक पहचान के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी और फ्लोरोसेंट पहचान के साथ क्रोमैटोग्राफी के लिए उच्च दक्षता विकिरण जैसे तरीकों को प्रस्तुत करता है। ऐसे डिटेक्टर जो बेंजो(ए)पाइरीन के विश्लेषणात्मक सिग्नल को रिकॉर्ड करने के लिए उपयुक्त हैं और उसी डिटेक्टर के आसपास की तर्कसंगतता को प्राइम किया गया है।

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मुख्य शब्द: पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक कार्बोहाइड्रेट, बेंज (ए) पाइरीन, अत्यधिक प्रभावी रिडिनल क्रोमैटोग्राफी, गैस क्रोमैटोग्राफी, फ्लोरिस्टेंस डिटेक्शन।

दंतकथा

परिचय

1. साहित्य समीक्षा

1.1.1 सामान्य जानकारी

1.1.2 पीएएच की उत्पत्ति

1.1.4 जैविक प्रभाव

1.1.5 बेंज(ए)पाइरीन। सामान्य जानकारी

1.2 बेंज़ोपाइरीन के निर्धारण की विधियाँ

1.2.1 गैस क्रोमैटोग्राफी

1.3 एचपीएलसी द्वारा पानी में बेंज़ोपाइरीन का निर्धारण

1.3.2 नमूना तैयार करना

1.3.3 स्नातक

1.3.4 एचपीएलसी विश्लेषण करना

1.3.5 डेटा पंजीकरण और प्रसंस्करण

1.4.2 बीपी का मात्रात्मक निर्धारण

ग्रंथ सूची

दंतकथा

पीएएच - पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन

बीपी - बेंज (ए) पाइरीन

एमपीसी - अधिकतम अनुमेय एकाग्रता

एमपीसी एसएस - औसत दैनिक अधिकतम अनुमेय एकाग्रता

एचपीएलसी - उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी

जीसी - गैस क्रोमैटोग्राफी

एलसी - तरल क्रोमैटोग्राफी

एनपीसी - सामान्य चरण क्रोमैटोग्राफी

आरपीसी - रिवर्स चरण क्रोमैटोग्राफी

एलएलई - तरल-तरल निष्कर्षण

ओएफएस - रिवर्स चरण सॉर्बेंट

टीएलसी - पतली परत क्रोमैटोग्राफी

परिचय

पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन (पीएएच) लगातार कार्बनिक प्रदूषकों के समूह से संबंधित हैं। उन्होंने कैंसरकारी गुणों का उच्चारण किया है। पीएएच के सबसे खतरनाक प्रतिनिधियों में से एक बेंजो(ए)पाइरीन (बीपी) है।

बेंज (ए) पाइरीन की खोज 1933 में की गई थी, और बाद में, 1935 में, इसकी कैंसरजन्यता की पुष्टि करने वाले अध्ययन किए गए थे। आज, बेंज़ो(ए)पाइरीन को खतरनाक वर्ग 1 कार्सिनोजेन के रूप में वर्गीकृत किया गया है। इसमें उत्परिवर्तजन गुण होते हैं। यहां तक ​​कि बीपी की थोड़ी सी मात्रा भी मानव शरीर पर नकारात्मक प्रभाव डालती है। लंबे समय तक संपर्क में रहने पर हवा में बीपी की सांद्रता अधिकतम अनुमेय सांद्रता (एमपीसी) से अधिक होने पर फेफड़ों का कैंसर हो सकता है। अत: इसकी पहचान एवं परिभाषा की समस्या विकट है। इसके भौतिक-रासायनिक गुणों के आधार पर, इसके निर्धारण के लिए कई समान तरीके विकसित किए गए हैं, जो केवल नमूना चयन और तैयारी के चरणों में भिन्न हैं। मेरे काम का उद्देश्य पीएएच और बीपी के गुणों से परिचित होना, पीएएच को अलग करने के तरीकों और बीपी निर्धारित करने के तरीकों का अध्ययन करना था।

1. साहित्य समीक्षा

1.1 पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन (पीएएच)

1.1.1 सामान्य जानकारी

पीएएच बेंजीन श्रृंखला के उच्च आणविक भार वाले कार्बनिक यौगिक हैं, जिनकी संख्या 200 से अधिक है। इनमें 2 से 7 बेंजीन रिंग होते हैं। पीएएच प्रकृति में व्यापक हैं और समय के साथ स्थिर होते हैं। उनमें कार्सिनोजेनिक और म्यूटाजेनिक गतिविधि होती है। उनकी विषाक्तता और कार्सिनोजेनिक गुणों के कारण, उन्हें प्राथमिकता प्रदूषक माना जाता है। पीएएच के निर्धारण का उपयोग पर्यावरण और भू-रासायनिक अध्ययन में किया जाता है। उनमें से सबसे जहरीले 3, 4-बेंजो (ए) पाइरीन और 1, 12-बेंज़पेरिलीन हैं, जो विशेष रूप से अक्सर पर्यावरणीय वस्तुओं में पाए जाते हैं।

1.1.2 पीएएच की उत्पत्ति

पीएएच जीवाश्म ईंधन जलाने का एक अवांछित उपोत्पाद है। वे प्रकृति में एबोजेनिक प्रक्रियाओं के माध्यम से बनते हैं। हर साल, ह्यूमिक मिट्टी के घटकों से निकलने वाले हजारों टन पीएएच जीवमंडल में प्रवेश करते हैं। लेकिन इनमें से अधिकांश कार्सिनोजन मानव निर्मित प्रक्रियाओं से आते हैं।

कोयले को न्यूनतम हाइड्रोजन सामग्री के साथ भारी मात्रा में पॉलीकंडेंस्ड सुगंधित बेंजीन नाभिक का मिश्रण माना जाता है। जब इन पदार्थों को भट्टियों, बिजली संयंत्रों और आंतरिक दहन इंजनों में जलाया जाता है, तो ये यौगिक विघटित हो जाते हैं। कम दहन तापमान और वायुमंडलीय ऑक्सीजन की अपर्याप्त आपूर्ति पर, प्रतिक्रियाशील एसिटिलीन और एलिफैटिक हाइड्रोकार्बन बनते हैं। एसिटिलीन ब्यूटाडीन में पोलीमराइज़ हो जाता है, जो आगे चलकर सुगंधित हाइड्रोकार्बन कोर बनाता है। जब इसे मौजूदा सुगंधित नाभिक में जोड़ा जाता है, तो पीएएच बनता है।

अपूर्ण दहन से कालिख नामक कार्बन कण उत्पन्न होते हैं। पीएएच इसकी सतह पर अवशोषित हो जाते हैं और पर्यावरण में प्रवेश कर जाते हैं।

1.1.3 पीएएच के भौतिक रासायनिक गुण

अधिकांश पीएएच उच्च गलनांक वाले क्रिस्टलीय यौगिक (कुछ नेफ़थलीन डेरिवेटिव के अपवाद के साथ) होते हैं। पीएएच पानी में खराब घुलनशील होते हैं। कार्बनिक सॉल्वैंट्स में जाने पर, उनकी घुलनशीलता बढ़ जाती है और उनके आणविक भार पर निर्भर करती है। एक नियम के रूप में, जैसे-जैसे सुगंधित वलय और एल्काइल रेडिकल्स की संख्या बढ़ती है, पीएएच की घुलनशीलता कम हो जाती है।

अधिकांश पीएएच यूवी विकिरण को तीव्रता से (300-420 एनएम) अवशोषित करते हैं और क्विनोन और कार्बोनिल यौगिकों को बनाने के लिए वातावरण में तेजी से फोटोऑक्सीडाइज़ करते हैं।

1.1.4 जैविक प्रभाव

पीएएच श्वसन पथ, त्वचा या पाचन तंत्र के माध्यम से शरीर में प्रवेश करते हैं।

शरीर के साथ पीएएच की अंतःक्रिया का प्रकार मुख्य रूप से हाइड्रोकार्बन पर ही निर्भर करता है। मूल रूप से, जब पीएएच शरीर में प्रवेश करते हैं, तो एंजाइमों की कार्रवाई के तहत वे एक एपॉक्सी यौगिक बनाते हैं जो गुआनिन के साथ प्रतिक्रिया करता है, जो डीएनए संश्लेषण में हस्तक्षेप करता है, गड़बड़ी पैदा करता है या उत्परिवर्तन का कारण बनता है जो कैंसर के विकास में योगदान देता है।

सबसे विषैले पीएएच में से एक, जैसा कि पहले उल्लेख किया गया है, बीपी है। इसके अलावा, बीपी के प्रभाव के कारण पीएएच की कार्सिनोजेनिक गतिविधि 70-80% है। इसलिए, खाद्य उत्पादों में बीपी की उपस्थिति का उपयोग अन्य पीएएच की उपस्थिति का आकलन करने के लिए किया जा सकता है।

1.1.5 बेंज(ए)पाइरीन। सामान्य विशेषताएँ

बेंज(ए)पाइरीन (सी 20 एच 12) एक रासायनिक यौगिक है, जो पॉलीसाइक्लिक हाइड्रोकार्बन के परिवार का प्रतिनिधि है (चित्र 1.1), प्रथम खतरा वर्ग का पदार्थ है। हाइड्रोकार्बन तरल, ठोस और गैसीय ईंधन के दहन के दौरान (कुछ हद तक गैसीय ईंधन के दहन के दौरान) बनता है।

चित्र 1.1 बेंजो(ए)पाइरीन का संरचनात्मक सूत्र।

बीपी में पीली प्लेटें या सुइयां होती हैं। यह गैर-ध्रुवीय सॉल्वैंट्स में अत्यधिक घुलनशील है, उदाहरण के लिए, टोल्यूनि, बेंजीन, जाइलीन में। यह ध्रुवीय विलायकों में कुछ हद तक कम घुलता है, लेकिन पानी में व्यावहारिक रूप से अघुलनशील होता है।

बीपी मुख्य रूप से मिट्टी में जमा होता है, कम अक्सर पानी में। मिट्टी से यह पौधों में प्रवेश करता है और पोषी श्रृंखला के साथ अपनी गति जारी रखता है। प्रत्येक बाद के स्तर पर, बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री परिमाण के क्रम से बढ़ जाती है।

बीपी एक विशिष्ट रासायनिक कैंसरजन है और न्यूनतम सांद्रता में भी मनुष्यों के लिए खतरनाक है, क्योंकि यह मानव शरीर में जमा हो जाता है। विभिन्न वस्तुओं में बेंजो(ए)पाइरीन की अधिकतम अनुमेय सांद्रता तालिका 1.1 में प्रस्तुत की गई है। इसके अलावा, बीपी में उत्परिवर्तजन गुण होते हैं, यानी। यह उत्परिवर्तन पैदा करने में सक्षम है।

तालिका 1.1 विभिन्न वातावरणों में बेंजो(ए)पाइरीन की एमपीसी

वस्तु का नाम	एमपीसी, एमसीजी/किग्रा
स्मोक्ड उत्पाद
अनाज
पेय जल
जलाशयों का जल

हवा में, औसत दैनिक अधिकतम अनुमेय सांद्रता (एमपीसी एसएस) 0.1 µg/100m 3 है।

1.2 बेंजो(ए)पाइरीन के निर्धारण की विधियाँ

पीएएच निर्धारित करने की मुख्य विधियां फ्लोरीमेट्रिक या स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्शन के साथ रिवर्स-चरण उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) और द्रव्यमान चयनात्मक, लौ आयनीकरण, इलेक्ट्रॉन कैप्चर या फोटोयोनाइजेशन डिटेक्शन के साथ गैस क्रोमैटोग्राफी (जीसी) हैं।

बीपी निर्धारित करने के लिए शपोलस्की प्रभाव पर आधारित ल्यूमिनसेंस स्पेक्ट्रोस्कोपी की विधि का भी उपयोग किया जाता है। प्रभाव का सार यह है कि कम तापमान पर, कुछ बहुपरमाणुक अणु उच्च-रिज़ॉल्यूशन अर्ध-रेखा ल्यूमिनसेंस स्पेक्ट्रा देते हैं। इस पद्धति का लाभ शुद्धिकरण और संवेदनशीलता की डिग्री पर इसकी कम मांग है। लेकिन बिजली आपूर्ति निर्धारित करने के लिए उपकरण की जटिलता एक महत्वपूर्ण सीमा है।

क्रोमैटोग्राफी पदार्थों के पृथक्करण, विश्लेषण और भौतिक-रासायनिक अध्ययन की एक विधि है, जो एक गतिशील चरण के प्रवाह में शर्बत परत के साथ पदार्थ के एक क्षेत्र की गति पर आधारित होती है, जिसमें बार-बार सोखने और सोखने की क्रियाएं दोहराई जाती हैं। पृथक्करण दो चरणों के बीच व्यक्तिगत पदार्थों के वितरण स्थिरांक में अंतर के कारण होता है। क्रोमैटोग्राफी की सबसे महत्वपूर्ण विशेषता प्रक्रिया की गतिशील प्रकृति है, जिसमें अणुओं या कणों की सांद्रता के वितरण में ग्रेडिएंट उत्पन्न होते हैं।

मिश्रण के घटकों को अलग करने की सामान्य योजना चित्र 1.2 में प्रस्तुत की गई है।

चित्र 1.2 क्रोमैटोग्राफिक प्रक्रिया के कार्यान्वयन की योजना

क्रोमैटोग्राफिक तरीकों के फायदों में मिश्रण में घटकों के पृथक्करण, पहचान और मात्रात्मक मूल्यांकन को दर्शाने वाले बड़ी संख्या में मापदंडों के एक साथ कार्यान्वयन की संभावना शामिल है। इस प्रकार, क्रोमैटोग्राफी सूचना का एक मल्टीचैनल स्रोत है।

मोबाइल चरण के एकत्रीकरण की स्थिति के आधार पर, क्रोमैटोग्राफ़िक विधियों को गैस और तरल क्रोमैटोग्राफी में विभाजित किया जाता है।

गैस क्रोमैटोग्राफी, बदले में, एकत्रीकरण की स्थिर स्थिति के आधार पर, गैस-तरल और गैस-ठोस-चरण क्रोमैटोग्राफी शामिल है।

तरल क्रोमैटोग्राफी को तरल-तरल, तरल-ठोस-चरण और तरल-जेल में विभाजित किया गया है।

1.2.1 गैस क्रोमैटोग्राफी

जीसी एक प्रकार की क्रोमैटोग्राफी है जिसमें मोबाइल चरण गैस या वाष्प की स्थिति में होता है - एक अक्रिय गैस। यह एक वाहक गैस है. स्थिर चरण एक उच्च आणविक भार तरल है जो एक छिद्रपूर्ण समर्थन या एक लंबी केशिका ट्यूब की दीवारों से जुड़ा होता है।

जीसी उन पदार्थों के मिश्रण को अलग करने की एक सार्वभौमिक विधि है जो बिना अपघटन के वाष्पित हो जाते हैं। मिश्रण के घटकों को एक वाहक गैस द्वारा क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के साथ ले जाया जाता है। इस मामले में, मिश्रण को वाहक गैस और स्थिर चरण के बीच बार-बार वितरित किया जाता है। ठोस चरण में मिश्रण घटकों की विभिन्न घुलनशीलता के कारण पृथक्करण होता है। जैसे ही पदार्थ कॉलम से बाहर निकलते हैं, उन्हें एक डिटेक्टर का उपयोग करके रिकॉर्ड किया जाता है।

डिटेक्टर एक सतत उपकरण है जो एक विश्लेषणात्मक संकेत रिकॉर्ड करता है। जीसी के लिए लगभग 60 प्रकार की पहचान प्रणालियाँ प्रस्तावित की गई हैं। तालिका 1.2 जीसी में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले डिटेक्टरों के प्रकार दिखाती है।

तालिका 1.2 गैस क्रोमैटोग्राफी डिटेक्टर

डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
तापीय चालकता द्वारा	विश्लेषक और वाहक गैस की तापीय चालकता में अंतर दर्ज किया जाता है
डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
इलेक्ट्रॉन-कब्जा	वाहक गैस के β-कणों या उच्च-ऊर्जा इलेक्ट्रॉनों के साथ विकिरण द्वारा उत्पन्न थर्मल इलेक्ट्रॉनों के विश्लेषण द्वारा कैप्चर करना
यूवी	एक विशिष्ट विश्लेषण क्रोमोफोर द्वारा यूवी प्रकाश का अवशोषण
माइक्रोवेव प्लाज्मा	माइक्रोवेव प्लाज्मा में विश्लेषक का उत्तेजना और पदार्थ में मौजूद तत्व की विशेषता तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश का उत्सर्जन
लौ फोटोमेट्रिक	किसी ज्वाला में विश्लेषक की उत्तेजना और प्रकाश का उत्सर्जन पदार्थ में मौजूद तत्व के प्रकार पर निर्भर करता है
परमाणु अवशोषण स्पेक्ट्रोमीटर	एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश के अवशोषण के बाद थर्मल परमाणुकरण
विद्युत	तरल प्रवाह द्वारा विश्लेषित पदार्थों का अवशोषण और प्रवाह में उनके विद्युत रासायनिक पता लगाना
आईआर स्पेक्ट्रोमीटर	विश्लेषक द्वारा आईआर क्षेत्र में प्रकाश का अवशोषण
ज्वाला आयनीकरण	विश्लेषित पदार्थों के दहन के दौरान लौ में आयनों का निर्माण और पंजीकरण
मास स्पेक्ट्रोमीटर	इलेक्ट्रॉन प्रभाव या रासायनिक आयनीकरण द्वारा आणविक और खंडित आयनों का निर्माण
फोटोआयनीकरण	विश्लेषक पर कठोर यूवी विकिरण के प्रभाव में आयनों का फोटोकैमिकल गठन और पंजीकरण

लौ आयनीकरण डिटेक्टर संवेदनशील है, लेकिन बीपी के लिए गैर-चयनात्मक है। इसलिए, इसका उपयोग केवल साधारण मिश्रणों के विश्लेषण के लिए किया जाता है।

इलेक्ट्रॉन कैप्चर डिटेक्टर बीपी के प्रति संवेदनशील और चयनात्मक दोनों है, लेकिन इलेक्ट्रोफिलिक यौगिकों के प्रति इसकी उच्च प्रतिक्रिया के कारण इसका उपयोग मुश्किल है।

बीपी निर्धारित करने के लिए फोटोआयनाइजेशन का उपयोग आशाजनक है, लेकिन संचालन की अस्थिरता और उपकरणों की उच्च लागत के कारण इसका व्यापक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है।

मास स्पेक्ट्रोमेट्रिक डिटेक्शन के साथ जीसी जटिल मिश्रणों में बेंजोपाइरीन के निर्धारण के लिए सबसे अच्छा समाधान प्रदान करता है

मास स्पेक्ट्रोमीटर का संचालन सिद्धांत टुकड़ों या आयनों को द्रव्यमान द्वारा वितरित करना है। आयनीकरण की प्रक्रिया का उपयोग तटस्थ अणुओं को आयनों में परिवर्तित करने के लिए किया जाता है। इलेक्ट्रॉन प्रभाव का उपयोग अक्सर कार्बनिक यौगिकों को आयनित करने के लिए किया जाता है। इसके अलावा, रासायनिक आयनीकरण का उपयोग किया जाता है, जो आयन-आणविक प्रतिक्रियाओं की घटना पर आधारित होता है। जैविक अणुओं, पॉलिमर और अन्य पदार्थों का अध्ययन करने के लिए जिन्हें अपघटन के बिना गैस चरण में स्थानांतरित नहीं किया जा सकता है, विशेष प्रकार के आयनीकरण का उपयोग किया जाता है।

मास स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्शन के साथ जीसी एकमात्र तरीका है जो मात्रात्मक निर्धारण के लिए आंतरिक मानकों के उपयोग की अनुमति देता है। पीएएच के 2H और 13C लेबल वाले आइसोमेरिक मिश्रण का उपयोग मानक पदार्थों के रूप में किया जाता है। बड़े पैमाने पर बदलाव और तथ्य यह है कि मानक पदार्थों में लगभग समान विशेषताएं होती हैं क्योंकि बिना लेबल वाले पीएएच पहचान की सुविधा प्रदान करते हैं।

मास स्पेक्ट्रोमीटर के छोटे नुकसानों में से एक डिटेक्टर प्रतिक्रिया की छोटी रैखिकता सीमा है। इसलिए, एक पारंपरिक मास स्पेक्ट्रोमीटर को टाइम-ऑफ़-फ़्लाइट मास स्पेक्ट्रोमीटर द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है। इसकी ख़ासियत यह है कि कम समय में यौगिकों का पूर्ण द्रव्यमान स्पेक्ट्रम और 0.0001 एएमयू तक सटीक द्रव्यमान माप प्राप्त करना संभव है।

गैस क्रोमैटोग्राफी के साथ टाइम-ऑफ़-फ़्लाइट मास स्पेक्ट्रोमीटर का संयोजन जटिल मिश्रण और कम पहचान सीमा के घटकों का अच्छा पृथक्करण प्रदान करता है।

1.2.2 तरल क्रोमैटोग्राफी

तरल क्रोमैटोग्राफी (एलसी) जटिल पदार्थों को अलग करने और उनका विश्लेषण करने की एक विधि है जिसमें मोबाइल चरण एक तरल होता है। एक ओर, मोबाइल चरण एक परिवहन कार्य करता है, अर्थात। एक गैर-अवशोषित पदार्थ को स्थानांतरित करता है, और दूसरी ओर संतुलन स्थिरांक को नियंत्रित करता है, और परिणामस्वरूप, स्थिर चरण के साथ और अलग किए गए पदार्थों के अणुओं के साथ बातचीत के परिणामस्वरूप अवधारण करता है।

एलसी में, अलगाव अक्सर कमरे के तापमान पर होता है। विश्लेषण किए जाने वाले नमूने को कॉलम में पेश किया जाता है और एलुएंट को उसमें से गुजारा जाता है। एलसी में, मोबाइल चरण की प्रकृति आवश्यक है। इसके लिए धन्यवाद, स्थिर चरण की एक छोटी संख्या और बड़ी संख्या में मोबाइल चरण के विभिन्न संयोजन विभिन्न प्रकार की विश्लेषणात्मक समस्याओं को हल करना संभव बनाते हैं।

शास्त्रीय तरल क्रोमैटोग्राफी में विश्लेषण में लंबा समय लगता है, क्योंकि नमूना प्रवाह दर कम है। यह विधि मिश्रण घटकों के प्रारंभिक पृथक्करण के लिए उपयुक्त है। ज्यादातर मामलों में, एचपीएलसी का उपयोग किया जाता है। उच्च पृथक्करण दक्षता के साथ तेजी से द्रव्यमान स्थानांतरण एचपीएलसी का उपयोग करके अणुओं, मैक्रोमोलेक्यूल्स और आयनों के निर्धारण की अनुमति देता है। शास्त्रीय एलसी और एचपीएलसी के बीच अंतर तालिका 1.3 में दिए गए हैं।

तालिका 1.3 शास्त्रीय और उच्च-प्रदर्शन एलसी के बीच प्रायोगिक अंतर

विशेषता	शास्त्रीय एल.सी	उच्च निष्पादन एलसी
दबाव, ए.टी.एम	एटीएम के अंशों से. दोपहर 2 बजे तक.
प्रवाह की गति, मिमी/मिनट
पृथक्करण की अवधि	कई घंटों से लेकर कई दिनों तक	कुछ मिनटों से लेकर कई घंटों तक
उपकरण	स्तंभ और सहायक उपकरण	क्रोमैटोग्राफ
पृथक्करण का प्रकार	प्रारंभिक पृथक्करण	विश्लेषणात्मक पृथक्करण
खोज	व्यक्ति का पता लगाना विश्लेषणात्मक तरीकों से अंश	एक डिटेक्टर का उपयोग करना
परीक्षण पदार्थ की मात्रा	कुछ माइक्रोग्राम से लेकर कई किलोग्राम तक	कई एनजी से लेकर कई एमसीजी तक

एचपीएलसी एक कॉलम क्रोमैटोग्राफी विधि है जिसमें मोबाइल चरण एक स्थिर चरण (शर्बत) से भरे क्रोमैटोग्राफी कॉलम के माध्यम से चलने वाला तरल होता है। एचपीएलसी कॉलम की विशेषता उच्च इनलेट प्रवाह प्रतिरोध है।

पदार्थों के पृथक्करण के तंत्र के आधार पर, निम्नलिखित एचपीएलसी विकल्प प्रतिष्ठित हैं:

क) वितरण;

बी) आयन एक्सचेंज;

ग) अनन्य;

घ) चिरल;

घ) सोखना।

विभाजन क्रोमैटोग्राफी की विधि बार-बार निष्कर्षण के समान, दो अमिश्रणीय तरल पदार्थों के बीच एक पदार्थ के वितरण पर आधारित है। तरल मोबाइल चरण से गुजरते समय, तरल स्थिर चरण में मिश्रण घटकों की विभिन्न घुलनशीलता के कारण पृथक्करण होता है।

आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी में, पदार्थों के मिश्रण के अणु, धनायनों और आयनों में घोल में अलग हो जाते हैं, सॉर्बेंट के आयनिक समूहों के साथ निर्धारित आयनों की बातचीत की अलग-अलग ताकत के कारण सॉर्बेंट के माध्यम से आगे बढ़ने पर अलग हो जाते हैं।

आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी में, पदार्थों के अणुओं को स्थिर चरण के छिद्रों में प्रवेश करने की उनकी अलग-अलग क्षमता के कारण आकार से अलग किया जाता है। इस मामले में, सबसे बड़े अणु जो स्थिर चरण के न्यूनतम संख्या में छिद्रों में प्रवेश करने में सक्षम होते हैं, वे स्तंभ छोड़ने वाले पहले होते हैं, और छोटे आणविक आकार वाले पदार्थ सबसे बाद में निकलते हैं।

चिरल क्रोमैटोग्राफी में, वैकल्पिक रूप से सक्रिय यौगिकों को अलग-अलग एनैन्टीओमर्स (मिरर आइसोमर्स) में अलग किया जाता है।

सोखना क्रोमैटोग्राफी में, पदार्थों को एक विकसित सतह वाले शर्बत की सतह से सोखने और उतारने की उनकी अलग-अलग क्षमताओं के कारण अलग किया जाता है।

मोबाइल और स्थिर चरणों की ध्रुवीयता के आधार पर, सोखना क्रोमैटोग्राफी को सामान्य-चरण (एनपीसी) और रिवर्स-चरण (आरपीसी) क्रोमैटोग्राफी में विभाजित किया जाता है।

एनपीसी एक ध्रुवीय अधिशोषक और एक गैर-ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है, जबकि ओपीसी एक गैर-ध्रुवीय अधिशोषक और एक ध्रुवीय मोबाइल चरण का उपयोग करता है।

यद्यपि तरल क्रोमैटोग्राफी एक नमूने को उसके घटकों में अलग करने की एक विधि है, एक आधुनिक तरल क्रोमैटोग्राफ में न केवल एक पृथक्करण प्रणाली शामिल है, बल्कि प्रत्येक घटक की सामग्री को मात्रात्मक रूप से मापने के लिए एक प्रणाली भी शामिल है, अर्थात। पता लगाने की प्रणाली. क्रोमैटोग्राफ आरेख चित्र 1.3 में दिखाया गया है।

बेंज़ोपाइरीन तरल क्रोमैटोग्राफीहाइड्रोकार्बन

चित्र 1.3 तरल क्रोमैटोग्राफ आरेख

1 - कॉलम के माध्यम से मोबाइल चरण की आपूर्ति के लिए पंप

2 - कॉलम में नमूना पेश करने के लिए डिस्पेंसर

3 - पृथक्करण स्तंभ

4 - डिटेक्टर - एक विश्लेषणात्मक संकेत प्राप्त करने के लिए उपकरण

5 - प्रसंस्करण प्रणाली - विश्लेषणात्मक संकेत को मानवीय धारणा के लिए सुविधाजनक रूप में परिवर्तित करना

विश्लेषणात्मक सिग्नल को पंजीकृत करने के लिए, जैसा कि पहले उल्लेख किया गया है, डिटेक्टरों का उपयोग किया जाता है। एलसी विभिन्न पहचान विधियों का उपयोग करता है। उनमें से कुछ की चर्चा तालिका 1.4 में की गई है।

तालिका 1.4 तरल क्रोमैटोग्राफी में डिटेक्टर

डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक	निक्षालन प्रक्रिया के दौरान, निक्षालन के ऑप्टिकल घनत्व को एक निश्चित तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है
फ्लोरिमेट्रिक	अवशोषित का फ्लोरोसेंट उत्सर्जन
डिटेक्टर का नाम	संचालन का सिद्धांत
रेफ्रेक्टोमेट्रिक	मोबाइल चरण के अपवर्तक सूचकांक से भिन्न अपवर्तक सूचकांक के आधार पर किसी पदार्थ की सांद्रता का निर्धारण
बाष्पीकरणीय लेजर प्रकाश डिटेक्टर	ऑपरेटिंग सिद्धांत मोबाइल चरण और विश्लेषण किए गए पदार्थों में शामिल क्रोमैटोग्राफिक सॉल्वैंट्स के वाष्प दबाव में अंतर पर आधारित है

एचपीएलसी में, बीपी निर्धारित करने के लिए एक फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर का उपयोग किया जाता है, जो बेंज़ोपाइरीन के लिए चयनात्मक है और इसमें उच्च संवेदनशीलता है। ऐसे डिटेक्टर का संचालन सिद्धांत अवशोषित प्रकाश के फ्लोरोसेंट उत्सर्जन को मापने पर आधारित है। माप मुख्य रूप से पदार्थों के किसी दिए गए समूह के लिए अधिकतम अवशोषण की तरंग दैर्ध्य पर यूवी क्षेत्र में किया जाता है। फ्लोरोसेंट विकिरण की तरंग दैर्ध्य हमेशा अवशोषित प्रकाश की तरंग दैर्ध्य से अधिक होती है। इस तथ्य के कारण कि पता लगाना शून्य तीव्रता से किया जाता है, फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर अवशोषण डिटेक्टरों की तुलना में अधिक संवेदनशील होते हैं।

मास स्पेक्ट्रोस्कोपिक डिटेक्टर के साथ एचपीएलसी के संयोजन को बेंज़ोपाइरीन के निर्धारण में आवेदन नहीं मिला है। यह इस तथ्य के कारण है कि अर्क की शुद्धता पर उच्च मांग रखी जाती है, अर्थात। श्रम-गहन नमूना तैयार करने के कारण विश्लेषण की अवधि बढ़ जाती है। इसके अलावा, उपकरण काफी महंगा है और पर्याप्त चयनात्मक और संवेदनशील नहीं है।

1.3 एचपीएलसी द्वारा पानी में बेंजो(ए)पाइरीन का निर्धारण

1.3.1 मापने के उपकरण, सहायक उपकरण, अभिकर्मक

माप के लिए, एक फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर के साथ एक एगिलेंट 1200 एचपीएलसी क्रोमैटोग्राफ का उपयोग किया जाता है (चित्र 1.4), जो 270-365 एनएम की सीमा में उत्तेजना तरंग दैर्ध्य रेंज और 390-460 एनएम की सीमा में प्रतिदीप्ति पंजीकरण प्रदान करता है।

चित्र 1.4 एजिलेंट 1200 एचपीएलसी क्रोमैटोग्राफ

क्रोमैटोग्राफ़िक कॉलम पीपीसी के लिए शर्बत से भरा होता है। प्रायोगिक शर्तों के तहत, स्तंभ दक्षता कम से कम 5000 सैद्धांतिक प्लेट होनी चाहिए।

नमूना तैयार करने के लिए, 2000 सेमी 3 की क्षमता वाले एक पृथक्करण फ़नल, एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता, एक जल स्नान, एक जल जेट पंप, एन-हेक्सेन, सोडियम क्लोराइड और सल्फेट, और एसीटोनिट्राइल का उपयोग करें।

अंशांकन समाधान तैयार करने के लिए, 25 और 50 सेमी 3 की क्षमता वाले फ्लास्क और 1, 2, 5 सेमी 3 की क्षमता वाले स्नातक पिपेट का उपयोग करें, सी = 1.0 μg/सेमी 3 की एकाग्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन का एक समाधान। और एसीटोनिट्राइल।

1.3.2 नमूना तैयार करना

तरल-तरल निष्कर्षण (एलएलई) का उपयोग पानी से बेंजो (ए) पाइरीन निकालने के लिए किया जाता है। बेंज(ए)पाइरीन को एन-हेक्सेन के साथ निकाला जाता है। ऐसा करने के लिए, 2000 सेमी 3 की क्षमता वाले पृथक्करण फ़नल में 1000 सेमी 3 की मात्रा वाला चुनिंदा पानी मिलाया जाता है और इसमें 25-30 सेमी 3 एन-हेक्सेन और 20 सेमी 3 सोडियम क्लोराइड (NaCl) की सांद्रता होती है। सी = 0.25 ग्राम/सेमी 3 मिलाया जाता है और मिश्रण को 10-15 मिनट तक हिलाते हुए निष्कर्षण किया जाता है। फिर जलीय परत को अलग कर दिया जाता है और NaCl मिलाए बिना दो बार और निष्कर्षण किया जाता है। बाद में, अर्क को एक शोषक से गुजारकर मिलाया और सुखाया जाता है, जो कम से कम 2 सेमी ऊंची सोडियम सल्फेट की परत वाला एक फ़नल होता है। एन-हेक्सेन के समान मात्रा के डाइक्लोरोमेथेन को अर्क एजेंट के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

निष्कर्षण के बाद, अर्क को एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता पर 3 - 5 सेमी 3 की मात्रा में वाष्पित किया जाता है - कम दबाव में आसवन द्वारा तरल पदार्थ को जल्दी से निकालने के लिए एक उपकरण। अवशेषों को 10 - 15 सेमी 3 की क्षमता वाली एक टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित किया जाता है और एन-हेक्सेन मिलाया जाता है, जिसके बाद टेस्ट ट्यूब को पानी के स्नान में रखकर वॉटर-जेट पंप के वैक्यूम में घोल को सूखने के लिए वाष्पित किया जाता है। 40 - 50 ओ सी के तापमान पर। अवशेष 0.2 - 0.5 सेमी 3 एसीटोनिट्राइल में घुल जाता है। परिणामी सांद्रण को कम से कम 15 मिनट तक रखा जाता है।

1.3.3 स्नातक

0.002 की सांद्रता के साथ 5 मानक समाधानों का उपयोग करके अंशांकन किया जाता है; 0.01; 0.02; 0.05 और 0.1 μg/cm3। अंशांकन समाधान की तैयारी तालिका 1.5 में वर्णित है।

तालिका 1.5 अंशांकन समाधान की तैयारी

	s, µg/cm3	с0, μg/cm3

समाधानों को एसीटोनिट्राइल के साथ निशान पर लाया जाता है।

प्रत्येक समाधान के लिए, कम से कम दो क्रोमैटोग्राम दर्ज किए जाते हैं। चित्र 1.5 0.002 μg/cm3 की सांद्रता के साथ बेंजो(ए)पाइरीन का एक क्रोमैटोग्राम दिखाता है।

चित्र 1.5 0.002 μg/cm3 की सांद्रता के साथ बेंजो(ए)पाइरीन का क्रोमैटोग्राम

प्राप्त क्षेत्रों के बीच विसंगति उनके अंकगणितीय औसत मूल्य के 7% से अधिक नहीं होनी चाहिए।

प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, द्रव्यमान सांद्रता पर शिखर क्षेत्र की निर्भरता के रूप में एक अंशांकन ग्राफ का निर्माण किया जाता है (चित्र 1.6)। अंशांकन ग्राफ रैखिक होना चाहिए. प्रत्येक समाधान के लिए, निर्दिष्ट मान से अंशांकन विशेषता द्वारा मापी गई द्रव्यमान सांद्रता का विचलन 12% से अधिक नहीं होना चाहिए। यदि विचलन निर्दिष्ट मान से अधिक है, तो अंशांकन दोहराया जाता है। अंशांकन न केवल माप से पहले किया जाता है, बल्कि कॉलम को बदलने के बाद या क्रोमैटोग्राफ पर रखरखाव और मरम्मत कार्य के दौरान भी किया जाता है।

चित्र 1.6 बेंजो(ए)पाइरीन सांद्रता पर शिखर क्षेत्र की अंशांकन निर्भरता (आर 2 = 0.998)

1.3.4 एचपीएलसी विश्लेषण करना

बेंज़ोपाइरीन का क्रोमैटोग्राफ़िक निर्धारण एक एजिलेंट 1200 एचपीएलसी कॉलम में किया जाता है; बेंज़ोपाइरीन शिखर के लिए कॉलम की दक्षता 5000 सैद्धांतिक प्लेटों से कम नहीं होनी चाहिए। स्तंभ का आंतरिक व्यास 2 मिमी है। कॉलम रिवर्स फेज़ सॉर्बेंट (आरपीएस) से भरा होता है। इस निर्धारण में, एक पूर्व-स्तंभ का उपयोग किया गया था जो एक सुरक्षात्मक कार्य करता है। प्री-कॉलम का आंतरिक व्यास 2 मिमी है, यह उसी ओएफएस से भरा हुआ है।

सिलिका जेल के आधार पर प्राप्त ग्राफ्टेड चरणों वाले सॉर्बेंट्स का उपयोग ओएफएस के रूप में किया जाता है। इस निर्धारण में, 5 माइक्रोन के कण आकार के साथ ऑक्टाडेसिलसिलिका जेल (सी 18) और 3.2 माइक्रोन के कण व्यास और 20-40 ई के औसत छिद्र व्यास के साथ हाइड्रोफोबिक माइक्रोपोरस हाइपर-क्रॉसलिंक्ड पॉलीस्टाइनिन का उपयोग शर्बत के रूप में किया गया था। यह शर्बत रासायनिक रूप से है पीएच = 2-7 ​​पर स्थिर। पृथक्करण की दक्षता सॉर्बेंट कणों के उच्च सतह क्षेत्र के साथ-साथ सॉर्बेंट की एक समान संरचना और सघन समान पैकिंग द्वारा सुनिश्चित की जाती है। ऐसे शर्बत का क्षमता गुणांक (k) 9.86 है।

मोबाइल चरण एसीटोनिट्राइल और पानी का मिश्रण है। एलुएंट को 8:2 के आयतन अनुपात में तैयार करें। 1000 सेमी 3 की क्षमता वाले एक ग्लास कंटेनर में 200 सेमी 3 पानी डालें और एसीटोनिट्राइल के साथ निशान को पतला करें। उपयोग से तुरंत पहले, एलुएंट को कम से कम 4 घंटे तक डीगैसिंग के लिए रखा जाता है। तेजी से डीगैसिंग के लिए, एलुएंट वाले कंटेनर को खाली कर दिया जाता है, एक वॉटर-जेट पंप से जोड़ा जाता है, और एक अल्ट्रासोनिक स्नान में रखा जाता है। एलुएंट की आपूर्ति लूप डोजिंग टैप (इंजेक्टर) द्वारा 10 मिमी 3 के लूप वॉल्यूम के साथ की जाती है, मोबाइल चरण की वॉल्यूमेट्रिक प्रवाह दर 200 मिमी 3 / मिनट है।

इन परिस्थितियों में, क्रोमैटोग्राफी में 20 - 30 मिनट लगते हैं।

1.3.5 परिणामों का पंजीकरण और प्रसंस्करण

प्रतिदीप्ति डिटेक्टर का उपयोग करके बेंज़ोपाइरीन का पता लगाया जाता है। क्रोमैटोग्राम को उत्तेजना तरंग दैर्ध्य l exc = 365 nm और रिकॉर्डिंग तरंग दैर्ध्य l रजिस्टर पर रिकॉर्ड करने की अनुशंसा की जाती है। = 400 - 460 एनएम.

इस तकनीक में संवेदनशीलता बढ़ाने के लिए, प्रतिदीप्ति उत्तेजना और उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य को प्रोग्राम योग्य रूप से बदल दिया गया। प्रोग्रामिंग मोड तालिका 1.6 में दिखाया गया है।

तालिका 1.6 प्रतिदीप्ति डिटेक्टर का उपयोग करते समय प्रोग्रामिंग मोड

जल विश्लेषण से प्राप्त क्रोमैटोग्राम चित्र 1.7 में दिखाया गया है।

चित्र 1.7 पानी में बीपी सामग्री का क्रोमैटोग्राम

बेंजोपाइरीन का शिखर अवधारण समय से निर्धारित होता है, क्योंकि यह बेंजो(ए)पाइरीन की गुणात्मक विशेषता है। बेंजो(ए)पाइरीन सामग्री की मात्रा निर्धारित करने के लिए, शिखर क्षेत्र की गणना की जाती है। फिर अंशांकन ग्राफ का उपयोग करके इसकी सांद्रता ज्ञात की जाती है।

यदि बेंजो (ए) पाइरीन की सांद्रता मानक समाधान की अधिकतम सांद्रता से अधिक है, तो विश्लेषण किए गए समाधान को पतला कर दिया जाता है और नमूने का फिर से विश्लेषण किया जाता है।

इस विधि का उपयोग करके बेंज़ोपाइरीन निर्धारण की संवेदनशीलता 0.01 μg/dm3 है।

1.4 जीसी द्वारा पानी में बेंजो(ए)पाइरीन का निर्धारण

1.4.1 नमूना संग्रह और तैयारी

विश्लेषण का एक महत्वपूर्ण हिस्सा नमूना संग्रह और तैयारी है। कई दिनों के अंतराल पर कई बार पानी का नमूना लिया जाता है। बाद में, पानी को फ़िल्टर किया जाता है और 0.5 लीटर का नमूना लिया जाता है। नमूने में सोडियम क्लोराइड मिलाया जाता है और रेफ्रिजरेटर में एक दिन से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाता है।

विश्वसनीय डेटा प्राप्त करने के लिए, एलएलई विधि का उपयोग करके नमूने से बीपी निकाला जाता है। अर्क डायथाइल ईथर है। निकासी तीन बार की जाती है। पहले दो बार पदार्थ को 50 मिलीलीटर अर्क की मात्रा में निकाला जाता है। तीसरी बार, अर्क की मात्रा 30 मिली है। सभी अर्क को एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता में संयोजित और वाष्पित किया जाता है जब तक कि ईथर पूरी तरह से हटा नहीं दिया जाता है। परिणामी नमूना 2 मिलीलीटर की मात्रा के साथ बेंजीन में भंग कर दिया जाता है।

बीपी के मात्रात्मक निर्धारण से पहले, मिश्रण के घटकों को पतली परत क्रोमैटोग्राफी (टीएलसी) द्वारा अलग किया जाता है।

टीएलसी एक क्रोमैटोग्राफिक विधि है जो स्थिर चरण के रूप में अधिशोषक की एक पतली परत के उपयोग पर आधारित है।

अलग करने से पहले, प्लेट को क्लोरोफॉर्म में कैफीन के 4% घोल में डुबोया जाता है और 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक सुखाने वाले कैबिनेट में सक्रिय किया जाता है। प्लेट से अशुद्धियों को हटाने के लिए, ठंडा होने के बाद, इसे क्लोरोफॉर्म से धोया जाता है और फिर से एक में सक्रिय किया जाता है। 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 30 मिनट के लिए कैबिनेट को सुखाना।

बेंजीन में घुले नमूनों को एक प्लेट पर लगाया जाता है और क्रोमैटोग्राफी की जाती है। एलुएंट 16:1 के आयतन अनुपात में साइक्लोहेक्सेन - एन-हेक्सेन का मिश्रण है।

1.4.2 परिमाणीकरण

इस विधि का उपयोग करके मात्रात्मक विश्लेषण गैस-तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा लौ आयनीकरण डिटेक्टर के साथ किया जाता है। विश्लेषण के लिए, एक लौ आयनीकरण डिटेक्टर के साथ एक Tsvet - 500 क्रोमैटोग्राफ (छवि 1.8) का उपयोग किया गया था।

चित्र 1.8 गैस क्रोमैटोग्राफ "रंग - 500"

नाइट्रोजन ने इस निर्धारण के लिए वाहक गैस के रूप में कार्य किया। नाइट्रोजन की आपूर्ति 3 मिली/मिनट की वॉल्यूमेट्रिक प्रवाह दर पर की गई थी। विश्लेषण के लिए 25 मीटर x 0.32 मिमी आकार के एक केशिका क्वार्ट्ज स्तंभ का उपयोग किया गया था। 0.4 माइक्रोन की फिल्म मोटाई के साथ मिथाइल सिलिकॉन तेल OV-101 का उपयोग स्थिर चरण के रूप में किया गया था। विश्लेषण तापमान प्रोग्रामिंग मोड में 210 से 300 डिग्री सेल्सियस तक 4 डिग्री सेल्सियस/मिनट की गति से किया गया था। 1 μl का एक नमूना मात्रा एक माइक्रोसिरिंज का उपयोग करके इंजेक्ट किया गया था।

चित्र 1.9 इस विधि का उपयोग करके प्राप्त बीपी क्रोमैटोग्राम दिखाता है।

चित्र 1.9 जीसी (3-बीपी) द्वारा प्राप्त बीपी का क्रोमैटोग्राम

मानक नमूने के अवधारण समय की तुलना में, जो 28 मिनट था, बीपी को अवधारण समय द्वारा गुणात्मक रूप से निर्धारित किया गया था।

बाहरी मानक विधि का उपयोग करके बीपी मात्रात्मक रूप से निर्धारित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, 1-20 एनजी/एमएल की एकाग्रता सीमा के साथ कई मानक नमूनों का उपयोग करके एक अंशांकन वक्र बनाएं। शिखर की ऊंचाई का उपयोग विश्लेषणात्मक संकेत के रूप में किया गया था।

बेंज(ए)पाइरीन पीएएच से संबंधित खतरनाक वर्ग 1 कार्सिनोजेन है। यह मिट्टी में, पानी में, हवा में, भोजन में हो सकता है और जब यह शरीर में प्रवेश करता है तो जमा हो जाता है। अत: विभिन्न वस्तुओं में इसका निर्धारण प्राथमिकता है।

बीपी की एमपीसी काफी कम है, इसलिए इसे निर्धारित करने के लिए संवेदनशील तरीकों का इस्तेमाल किया जाता है। इसके निर्धारण की कठिनाई इस तथ्य में भी निहित है कि बीपी के अलावा, नमूने में इसके आइसोमर्स, जैसे बेंजो (ई) पाइरीन और पेरीलीन शामिल हो सकते हैं, जिनका अवधारण समय लगभग बीपी के समान ही है। अर्थात्, आइसोमर्स की उपस्थिति से पदार्थ की पहचान करना मुश्किल हो जाता है। इस समस्या को पहले टीएलसी द्वारा मिश्रण को अलग करने के साथ-साथ मानक बीपी नमूनों का उपयोग करके हल किया जाता है।

इस पाठ्यक्रम कार्य में कई क्रोमैटोग्राफ़िक विधियों की जांच की गई जो बेंजो(ए)पाइरीन के निर्धारण के लिए उपयुक्त हैं। साहित्य के साथ प्रारंभिक कार्य के बाद, इसके मात्रात्मक निर्धारण के लिए तरीकों का चुनाव उचित था। विधि के आधार पर, विधियों का चयन किया गया और इन विधियों का उपयोग करके प्राप्त क्रोमैटोग्राम प्रस्तुत किए गए हैं।

ग्रंथ सूची

1. ट्रैवेन वी.एफ. कार्बनिक रसायन विज्ञान। विश्वविद्यालयों के लिए पाठ्यपुस्तक: 3 खंड / वी. एफ. ट्रैवेन - एम.: बिनोम। ज्ञान प्रयोगशाला, 2013. --. - टी. 2. - 2013. - 517 पी.

2. ग्रेचिश्चेवा एन. यू. पॉलीन्यूक्लियर एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन के साथ ह्यूमिक एसिड की परस्पर क्रिया: रासायनिक और विष विज्ञान संबंधी पहलू: शोध प्रबंध... डॉक्टर ऑफ केमिस्ट्री की वैज्ञानिक डिग्री के लिए। विज्ञान: 02.00.13 / एन. यू. ग्रेचिश्चेवा। - एम., 2000. - 157 पी.

3. पैट. 2466406 रूसी संघ। तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा मूत्र में बेंजो (ए) पाइरीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए तरीके / जैतसेवा एन.वी., उलानोवा टी.एस., कोर्नाझिट्स्काया टी.डी., किस्लित्सिना ए.वी., पशेनिचनिकोवा ई.ओ., पर्म्याकोवा टी.एस. - संख्या 2011142553/15; आवेदन 20.10.11; प्रकाशन 11/10/12, बुलेटिन। क्रमांक 31.

4. रसायनों की अधिकतम अनुमेय सांद्रता (एमएसी): जीएन 2.1.7.2041-06। -- [2006-02-07 को प्रस्तुत]। - एम.: स्टैंडआर्टिनफॉर्म, 2006. - 7 पी.

5. त्सिम्बल्युक के.के. पर्यावरणीय वस्तुओं में पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन (पीएएच) का निर्धारण (समीक्षा) / के. के. त्सिम्बल्युक, यू. एम. डेंगा, वी. पी. एंटोनोविच // रासायनिक विश्लेषण के तरीके और वस्तुएं। -- 2013. -- टी. 8, संख्या 2. -- पी. 50 - 62.

6. ज़ोलोटोव यू.ए. विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान के मूल सिद्धांत। सामान्य मुद्दे। पृथक्करण की विधियाँ: 2 पुस्तकों में। / यू. ए. ज़ोलोटोव, ई. एन. डोरोखोवा, वी. आई. फादेवा, आदि एड। यू. ए. ज़ोलोटोवा। - एम.: उच्चतर. स्कूल, 2002. --. - किताब 1.--2002.--351 पी.

7. त्सरेव एन.आई. प्रैक्टिकल गैस क्रोमैटोग्राफी। विशेष पाठ्यक्रम "विश्लेषण के गैस क्रोमैटोग्राफिक तरीके" / एन.आई. त्सरेव, वी. - बरनौल: अल्ताई स्टेट यूनिवर्सिटी पब्लिशिंग हाउस, 2000. - 156 पी।

8. ड्रगोव यू.एस. प्रदूषित हवा का गैस क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण / यू.एस. ड्रगोव, ए.ए. रोडिन। -- एम.: बिनोम. ज्ञान प्रयोगशाला, 2015. -- 531 पी.

9. स्टायस्किन ई. एल. प्रैक्टिकल हाई-परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी / ई. एल. स्टायस्किन, एल. बी. इटिकसन, ई. वी. ब्रैड। --एम.: रसायन विज्ञान, 1986. -- 210 एस

10. दिमित्रिकोव वी.पी. उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन का विश्लेषण / वी.पी. दिमित्रिकोव, ओ.जी. लारियोनोव, वी.एम. नबीवाच // रसायन विज्ञान में प्रगति। -- 1986. -- टी. 2, संख्या 4. -- पी. 679 -700.

11. पीने का पानी. बेंजो(ए)पाइरीन की सामग्री निर्धारित करने की विधि: GOST 31860 - 2012। -- [2014-01-01 को प्रस्तुत]। - एम.: स्टैंडआर्टिनफॉर्म, 2014. - 11 पी। -- (अंतरराज्यीय मानक)।

12. बोर्श एन.ए. उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा बेंज़ोपाइरीन का निर्धारण / एन.ए. बोर्श, एस.वी. सिडोरेंको // विज्ञान और प्रौद्योगिकी के विकास में आधुनिक रुझान। -- 2016. -- टी. 1, क्रमांक 2. -- पी.37 - 41.

13. प्रोस्कुरिना एन.ए. ठोस-चरण निष्कर्षण का उपयोग करके वसा युक्त खाद्य उत्पादों में पॉलीन्यूक्लियर एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन का निर्धारण / एन.ए. प्रोस्कुरिना, वी.ए. दावानकोव, एम.एम. इलिन // सोरशन और क्रोमैटोग्राफिक प्रक्रियाएं। -- 2009. -- टी. 9, संख्या 2. -- पी. 167 - 176.

14. नज़रकिना एस.जी. पिघले पानी के पर्यावरण नियंत्रण में केशिका गैस क्रोमैटोग्राफी / एस.जी. नज़रकिना, पी.पी. पुरगिन, ए.वी. बुलानोवा, ओ.जी. लारियोनोव // सैमएसयू का बुलेटिन। - 2000. - टी. 2, . -- पृ. 152 -156.

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बेंज़ोपाइरीन पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन - पीएएच के वर्ग से संबंधित है। यह कार्बनिक यौगिकों का एक समूह है जिसकी रासायनिक संरचना में बेंजीन रिंग होते हैं - तीन रिंग या अधिक के समूह। बेंज़ोपाइरीन की रासायनिक परिभाषा: कार्बन युक्त एक कार्बनिक पदार्थ, पॉलीसाइक्लिक हाइड्रोकार्बन के समूह का हिस्सा, जिसका दाढ़ द्रव्यमान 252.31 ग्राम/मोल है।

बेंज़ोपाइरीन क्या है

बेंज़ोपाइरीन, सभी पीएएच की तरह, मुख्य रूप से तकनीकी प्रगति का परिणाम है, मानव गतिविधि का परिणाम है। पीएएच के तकनीकी प्रदूषण के मुख्य स्रोत ठोस और तरल कार्बनिक पदार्थों का दहन हैं, जिनमें तेल और पेट्रोलियम उत्पाद, लकड़ी और मानवजनित अपशिष्ट शामिल हैं। बेंज़ोपाइरीन के प्राकृतिक स्रोतों में जंगल की आग और ज्वालामुखी विस्फोट शामिल हैं।

हालाँकि, बेंजोपाइरीन का निर्माण दहन प्रक्रियाओं के बिना हो सकता है - पायरोलिसिस, सुलगने, पोलीमराइजेशन के दौरान।

धूम्रपान करने पर बेंजोपाइरीन निकलता है: एक सिगरेट के धुएं में बेंजोपाइरीन की मात्रा औसतन 0.025 एमसीजी होती है, जो अधिकतम अनुमेय सांद्रता (औसतन 10,000 -15,000 गुना) से कई गुना अधिक है। यह गणना की गई है कि बेंज़ोपाइरीन सामग्री के संदर्भ में एक सिगरेट पीना सोलह घंटे के निकास धुएं के बराबर है।

बेंजोपाइरीन फार्मूला

बेंज़ोपाइरीन के दो आइसोमर्स हैं। पहला 1,2-बेंजोपाइरीन (3,4-बेंजोपाइरीन) है - सभी दहन उत्पादों में निहित है - तेल, टार, कोयला, विभिन्न मूल के धुएं सहित। अपने शुद्ध रूप में, ये सुई के आकार के क्रिस्टल या हल्के पीले रंग की प्लेटें होती हैं, जिनका गलनांक लगभग 177 डिग्री सेल्सियस होता है।

4,5-बेंज़ोपाइरीन - हल्के पीले रंग की सुइयों और प्लेटों के रूप में क्रिस्टल, 179 डिग्री सेल्सियस के पिघलने बिंदु के साथ। कोयला टार में निहित, मिट्टी में पाया जाता है (विशेषकर उद्यमों और राजमार्गों के पास)। इसमें उत्परिवर्तजन या कार्सिनोजेनिक गुण नहीं हैं।

बेंज़ोपाइरीन का रासायनिक सूत्र C20H12 है।

मिट्टी और हवा में बेंज़ोपाइरीन

बेंज़ोपाइरीन व्यावहारिक रूप से कभी भी स्वतंत्र अवस्था में नहीं पाया जाता है, लेकिन हमेशा हवा में मौजूद कणों पर जमा होता है। हवा के बढ़ते द्रव्यमान के साथ, बेंज़ोपाइरीन एक बड़े क्षेत्र में फैल जाता है, और हवा से ठोस कणों के साथ गिरते हुए (उदाहरण के लिए, वर्षा के दौरान) यह मिट्टी की परतों, जलाशयों और इमारतों की सतहों पर समाप्त हो जाता है।

इसका स्रोत, जैसे सड़क परिवहन, बेंज़ोपाइरीन के प्रवासन और संचय में भी भूमिका निभाता है। एक ओर, लंबी दूरी तक गाड़ी चलाते समय, कारें बेंज़ोपाइरीन के समान वितरण में योगदान करती हैं। दूसरी ओर, बसे हुए बेंजोपाइरीन राजमार्गों और उनके निकट की वस्तुओं (तथाकथित "द्वितीयक स्रोत") पर बड़ी मात्रा में जमा हो जाते हैं।

बेंज़ोपाइरीन प्रकृति में पदार्थों के चक्र में आसानी से "शामिल" हो जाता है: वायुमंडलीय वर्षा के साथ, जिसमें हमेशा ठोस कण होते हैं, इसे पीएएच के मुख्य स्रोत से दूर के क्षेत्रों तक भी ले जाया जाता है, जल निकायों में प्रवेश करता है, जहां से, वाष्पीकरण प्रक्रियाओं के दौरान, यह फिर से हवा में उठ जाता है. बेंज़ोपाइरीन की प्रवासन की यह क्षमता ही इस तथ्य की ओर ले जाती है कि इसकी सामग्री उन स्थानों पर अधिक हो सकती है जहां इस पदार्थ का कोई शक्तिशाली स्रोत नहीं है।

पर्यावरण में प्रवेश करने और उसमें जमा होने पर, बेंज़ोपाइरीन पौधों में प्रवेश करता है, जो बाद में पशुओं के लिए चारे के रूप में काम करता है या मानव पोषण में उपयोग किया जाता है। पौधों में बेंज़ोपाइरीन की सांद्रता मिट्टी में इसकी मात्रा से अधिक होती है, और खाद्य उत्पादों (या फ़ीड) में उनके उत्पादन के लिए कच्चे माल की तुलना में अधिक होती है। बेंज़ोपाइरीन सहित रसायनों की सांद्रता बढ़ाने के इस प्रभाव को जैवसंचय कहा जाता है।

इस प्रकार, बेंज़ोपाइरीन न केवल पृष्ठभूमि पर्यावरण प्रदूषण के रूप में, बल्कि खाद्य श्रृंखला के माध्यम से शरीर में प्रवेश करने वाले पदार्थ के रूप में भी खतरा पैदा करता है।

बेंज़ोपाइरीन की अधिकतम अनुमेय सांद्रता

बेंज़ोपाइरीन के निर्धारण और निगरानी के लिए मुख्य विधि तरल क्रोमैटोग्राफी विधि है।

स्वच्छता मानक 2.1.6.695-98 और 2.1.6.1338-03 के अनुसार, हवा में बेंज़ोपाइरीन की अधिकतम अनुमेय औसत दैनिक मात्रा (एमपीए) 0.1 μg/100 m3 या 10-9 g/m3 है, और मिट्टी में इसका MAC तदनुसार है स्वच्छता मानक 2.1.7.2041-06 - पृष्ठभूमि स्तर को ध्यान में रखते हुए कुल मिलाकर 0.02 मिलीग्राम/किग्रा। कार्यस्थलों पर हवा में, औसत शिफ्ट अधिकतम अनुमेय सांद्रता 0.00015 mg/cub.m से अधिक नहीं है। (खंड 1 और खंड 2 से। जीएन 2.2.5. 1313-03)।

पानी में बेंज़ोपाइरीन की अधिकतम अनुमेय सांद्रता 0.000001 mg/l से अधिक नहीं है, केंद्रीकृत जल आपूर्ति प्रणाली वाले पीने के पानी में - 0.000005 mg/l से अधिक नहीं है। बोतलबंद पीने के पानी में - पहली गुणवत्ता श्रेणी के बोतलबंद पानी में 0.001 µg/l (उच्चतम गुणवत्ता वाला पानी) से 0.005 µg/l से अधिक नहीं।

ऐसे खाद्य उत्पादों में जिनमें तकनीकी विशेषताओं के कारण बेंज़ोपाइरीन की उपस्थिति अनुमेय है, बेंज़ोपाइरीन का अनुमेय स्तर 0.001 मिलीग्राम/किग्रा से अधिक नहीं है। इनमें शामिल हैं: सॉसेज और ऑफल का उपयोग करने वाले उत्पाद, जिनमें स्मोक्ड भी शामिल है; स्मोक्ड लार्ड; मांस और पोल्ट्री उपोत्पादों से सॉसेज और स्मोक्ड उत्पाद; स्मोक्ड डिब्बाबंद और संरक्षित मछली, स्मोक्ड मछली; खाद्यान्न.

धुएँ के स्वादों का उपयोग करते समय, बेंज़ोपाइरीन की मात्रा 2 µg/kg(l) से अधिक नहीं होनी चाहिए, और उनके उपयोग के बाद, तैयार उत्पादों में बेंज़ोपाइरीन की मात्रा 0.03 µg/kg(l) से अधिक नहीं होनी चाहिए।

अन्य खाद्य उत्पादों में बेंज़ोपाइरीन की उपस्थिति की अनुमति नहीं है।

हालाँकि, निगरानी परिणामों के अनुसार, बेंज़ोपाइरीन सामग्री मानक कई गुना अधिक थे। औसतन, शहरों में वायु प्रदूषण का स्तर एमपीसी से 5-12 गुना अधिक है, मिट्टी में - 3-7 गुना, खाद्य उत्पादों में - 1.5 से 11 गुना तक।

मानव शरीर पर बेंज़ोपाइरीन का प्रभाव

बेंज़ोपाइरीन को प्रथम खतरा वर्ग के पदार्थ के रूप में वर्गीकृत किया गया है। पहला खतरा वर्ग पर्यावरण पर अत्यधिक खतरनाक प्रभाव वाले पदार्थ हैं, जबकि उनके कारण होने वाले परिवर्तन अपरिवर्तनीय हैं और उन्हें बहाल नहीं किया जा सकता है।

बेंज़ोपाइरीन सबसे शक्तिशाली और साथ ही व्यापक कैंसरजन में से एक है। रासायनिक और तापीय रूप से स्थिर होने के कारण, जैवसंचय गुणों से युक्त होने के बाद, एक बार यह शरीर में प्रवेश करने और जमा होने के बाद, लगातार और शक्तिशाली रूप से कार्य करता है। कार्सिनोजेनिक होने के अलावा, बेंज़ोपाइरीन में उत्परिवर्तजन, भ्रूणोटॉक्सिक और हेमेटोटॉक्सिक प्रभाव होते हैं।

बेंज़ोपाइरीन के शरीर में प्रवेश करने के तरीके अलग-अलग हैं: भोजन और पानी के साथ, त्वचा के माध्यम से और साँस के माध्यम से। खतरे की डिग्री उस मार्ग से स्वतंत्र है जिसके माध्यम से बेंज़ोपाइरीन शरीर में प्रवेश करती है। प्रयोगों में, साथ ही पर्यावरण की दृष्टि से प्रतिकूल क्षेत्रों के निगरानी आंकड़ों के अनुसार, बेंज़ोपाइरीन को डीएनए कॉम्प्लेक्स में पेश किया जाता है, जिससे अपरिवर्तनीय उत्परिवर्तन होते हैं जो बाद की पीढ़ियों तक चले जाते हैं। बेंज़ोपाइरीन जैवसंचय का तथ्य विशेष चिंता का विषय है: जैवसंचय के कारण अगली पीढ़ी की संतानों में उत्परिवर्तन विकसित होने की संभावना कई गुना बढ़ जाती है।

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गोस्ट 24104.

रोटरी बाष्पीकरणकर्ता IR-1M।

गोस्ट 25336.

पानी का स्नान।

इलेक्ट्रिक हीटिंग के साथ चुंबकीय स्टिरर प्रकार MM-ZM।

250 - 700 एनएम की वर्णक्रमीय सीमा के साथ "क्रोमैटोस्कोप" प्रकार का पराबैंगनी प्रकाशक और यूवी विकिरण के स्रोत के रूप में एक बीयूवी-15 लैंप।

ग्लास क्रोमैटोग्राफ़िक कक्ष 40 x 40 x 40 सेमी।

पतली परत क्रोमैटोग्राफी के लिए ग्लास प्लेटें 5 x 20 और 20 x 20 सेमी।

ग्लास क्रोमैटोग्राफ़िक कॉलम 500 मिमी लंबा और 20 मिमी व्यास वाला एक सिरा नीचे की ओर खींचा गया है और 50 - 60 सेमी 3 पीएसएच 14/23 की क्षमता वाला एक जलाशय है।

रेफ्रिजरेटर KhPT-2-400-29/32 HS या KhSh-1-400-29/32 HS गोस्ट 25336.

लंबे प्रकार के AIO-14/23-50 TS या AIO-14/23-14/23-65 TS के अनुसार गोस्ट 25336.

0.1 सेमी विभाजन के साथ मापने वाला शासक गोस्ट 427.

डिफ्लेग्मेटर 250-19/26-29/32 टीएस या 300-19/26-29/32 गोस्ट 25336.

नोजल पी-1-19/26-14/23-14/23 टीएस या एन-2-19/26-14/23 टीएस के अनुसार गोस्ट 25336.

गोस्ट 25336.

गोस्ट 25336. ग्रेजुएटेड सिलेंडर 1-100, 1-250 या 3-100, 3-250 गोस्ट 25336.

रासायनिक बीकर V-1-100 या V-1-150 गोस्ट 25336.

फ्लास्क K-1-100-29/32 THS, K-1-25R-29/32 THS, K-1-500-29/32 THS या P-1-500-29/32 THS के अनुसार गोस्ट 25336.

बुचनर फ़नल 1 या 2 या 3 गोस्ट 9147.

वज़न कप (बग) SV-14/8 या SV-19/9, या SV-24/10, या SV-34/12 गोस्ट 25336.

माइक्रोसिरिंज प्रकार MSh-10, ग्लास केशिकाएँ।

यूनिवर्सल इंडिकेटर पेपर.

प्रयोगशाला फ़िल्टर पेपर गोस्ट 12026.

स्केलपेल या पतला स्पैटुला.

रेक्टिफाइड एथिल अल्कोहल के अनुसार गोस्ट आर 51652या तकनीकी सुधारित एथिल अल्कोहल गोस्ट 18300.

नियामक दस्तावेज़ के अनुसार एसीटोनिट्राइल।

नियामक दस्तावेज़ के अनुसार माइक्रोक्रिस्टलाइन पाउडर सेलूलोज़।

गोस्ट आर 51650-2000

बेंज (सी) क्रिसीन, मुख्य पदार्थ की सामग्री 98% से कम नहीं है।

सेफैडेक्स एलएच-20।

नियामक दस्तावेज़ के अनुसार सिलिका जेल ब्रांड ASKG।

इसे मेट्रोलॉजिकल विशेषताओं वाले अन्य माप उपकरणों और तकनीकी विशेषताओं वाले उपकरणों के साथ-साथ उपरोक्त से कम गुणवत्ता वाले अभिकर्मकों और सामग्रियों का उपयोग करने की अनुमति है।

5.2 परीक्षण के लिए तैयारी

5.2.1 विलायकों की तैयारी

सॉल्वैंट्स (एन.हेक्सेन, एथिल अल्कोहल, एसीटोन, बेंजीन) को रिफ्लक्स कंडेनसर के साथ पारंपरिक विधि का उपयोग करके आसुत किया जाता है।

आसवन फ्लास्क में प्रति 1 डीएम 3 विलायक में 120 सेमी 3 बेंजीन और 36 सेमी 3 पानी मिलाकर डाइमिथाइलफॉर्मामाइड को आसुत किया जाता है।

5.2.2 एसिटिलेटेड सेल्युलोज की तैयारी

(50.0 ± 2.0) ग्राम माइक्रोक्रिस्टलाइन सेलुलोज को 500 सेमी 3 की क्षमता वाले एक फ्लैट-तले वाले फ्लास्क में रखा जाता है, 150 सेमी 3 बेंजीन या टोल्यूनि, 70 सेमी 3 एसिटिक एनहाइड्राइड और 0.3 सेमी 3 सल्फ्यूरिक एसिड का मिश्रण तैयार किया जाता है। एक अलग फ्लास्क में डाला जाता है। प्रतिक्रिया मिश्रण को चुंबकीय स्टिरर से 6-8 घंटे तक हिलाया जाता है, 18 घंटे तक बिना हिलाए छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद तरल चरण को निथार दिया जाता है, और अवशेष को 300 सेमी 3 एथिल अल्कोहल के साथ डाला जाता है, हिलाया जाता है, अल्कोहल में छोड़ दिया जाता है। 24 घंटे, फिर सेल्युलोज को बुचनर फ़नल पर फ़िल्टर किया जाता है, 100 सेमी 3 एथिल अल्कोहल और आसुत जल से धोया जाता है जब तक कि धोने का पानी तटस्थ न हो जाए (संकेतक पेपर के अनुसार)।

फिर एसिटिलेटेड सेलूलोज़ की क्रोमैटोग्राफ़िक गतिविधि की जाँच की जाती है। ऐसा करने के लिए, विश्लेषण से 3-4 घंटे पहले, 60:25:15 के आयतन अनुपात में लिया गया एथिल अल्कोहल, एसीटोन और पानी का मिश्रण तैयार करें, और इसे फिल्टर पेपर के स्ट्रिप्स के साथ पंक्तिबद्ध क्रोमैटोग्राफिक कक्ष में डालें। विलायक परत की ऊंचाई 1.5 - 2 सेमी होनी चाहिए। 1.5 ग्राम एसिटिलेटेड सेलूलोज़ को 7 सेमी 3 एथिल अल्कोहल में निलंबित कर दिया जाता है और निलंबन को एक समान परत में 5 x 20 सेमी कांच की प्लेट पर डाला जाता है, विलायक को अनुमति दी जाती है पूरी तरह से हवा में वाष्पित हो जाता है और 1 μg/cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन के समाधान के 5 μl के एक बिंदु में एक माइक्रोसिरिंज या ग्लास केशिका के साथ प्लेट पर लगाया जाता है। प्लेट को क्रोमैटोग्राफी कक्ष में रखा जाता है और तब तक कक्ष में छोड़ दिया जाता है जब तक कि विलायक का स्तर प्रारंभिक रेखा से कम से कम 100 मिमी तक न बढ़ जाए। क्रोमैटोग्राफी के अंत में, प्लेट को हटा दिया जाता है, हवा में सुखाया जाता है, और एक पराबैंगनी विकिरणक लैंप के नीचे एक नीला फ्लोरोसेंट बेंजो (ए) पाइरीन स्पॉट नोट किया जाता है। प्रारंभिक रेखा से विलायक के सामने और बेंजो(ए)पाइरीन स्पॉट के मध्य तक की दूरी मापें; आरजे के मूल्य की गणना करें, जो सूत्र का उपयोग करके प्लेट के साथ बेंजो (ए) पाइरीन की गति की दर का अनुमान लगाता है:

जहां एक्स बीपी प्रारंभिक रेखा से बेंजो (ए) पाइरीन स्पॉट के मध्य तक की दूरी है, मिमी;

एल प्रारंभिक रेखा से विलायक के मोर्चे तक की दूरी है, मिमी।

बेंजो(ए)पाइरीन का आरजे मान 0.1 होना चाहिए।

वर्किंग प्लेट तैयार करने के लिए, 5 ग्राम एसिटिलेटेड सेलूलोज़ को 20 सेमी 3 एथिल अल्कोहल में निलंबित कर दिया जाता है और 20x20 सेमी प्लेट पर एक समान परत में डाला जाता है।

5.2.3 बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(बी)क्रिसीन के मानक समाधान तैयार करना

(10.0+0.2) मिलीग्राम बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(बी)क्रिसीन को तौलने वाले कप में तौला जाता है। तौले गए हिस्से को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है: बेंज (ए) पाइरीन-बेंजीन, बेंज (ए) क्रिसीन-एसिटोनिट्राइल, फिर बेंजो (ए) पाइरीन समाधान की मात्रा को निशान के साथ समायोजित किया जाता है बेंजीन, बेंज (ए) क्रिसीन-एसीटोनिट्राइल समाधान की मात्रा। परिणामी समाधानों की द्रव्यमान सांद्रता 100 μg/cm 3 है। समाधानों को तीन महीने से अधिक समय तक ठंडी, अंधेरी जगह में संग्रहित किया जाता है।

5.2.4 बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(बी)क्रिसीन के कार्यशील समाधान तैयार करना

1, 5 और 10 सेमी 3 की क्षमता वाले पिपेट और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क का उपयोग करके मानक समाधानों को पतला करके कार्यशील समाधान तैयार किए जाते हैं, समाधान की मात्रा को उचित विलायक के साथ निशान पर समायोजित किया जाता है, मिश्रित किया जाता है और संग्रहीत किया जाता है। एक महीने से अधिक समय तक किसी ठंडी, अंधेरी जगह पर न रहें।

1.0 माइक्रोग्राम/सेमी 3 (स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा निर्धारण के लिए) की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन का एक समाधान तैयार करना: मानक समाधान से 1.0 सेमी 3 लिया जाता है और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है; घोल की मात्रा को बेंजीन के निशान के अनुसार समायोजित किया जाता है।

बेंजो (ए) पाइरीन द्रव्यमान सांद्रता 0.25: 1.0 और 5.0 μg/सेमी 3 (उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा निर्धारण के लिए) के समाधान की तैयारी: 0.25 मानक समाधान से लिया जाता है; 1.0; क्रमशः 5.0 सेमी 3, और 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया गया; समाधान की मात्रा को एसीटोनिट्राइल के निशान के अनुसार समायोजित किया जाता है।

0.5 और 10 μg/सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंज़ (बी) क्रिसीन समाधान तैयार करना: 0.5 और 10 सेमी 3 क्रमशः मानक समाधान से लिया जाता है, और 100 सेमी 3 की क्षमता के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है; प्रत्येक घोल की मात्रा को एसीटोनिट्राइल के निशान के अनुसार समायोजित किया जाता है।

5.2.5 अंशांकन समाधान तैयार करना

बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(बी)क्रिसीन के मिश्रण का अंशांकन समाधान तैयार करने के लिए, 100 μg/cm3 की द्रव्यमान सांद्रता वाले बेंजो(ए)पाइरीन के एक मानक समाधान की मात्रा और तालिका 2 में दिए गए एक कार्यशील समाधान की मात्रा है बेंज़ (सी) क्रिसीन द्रव्यमान सांद्रता 10 μg/cm 3 के 1 सेमी 3 समाधान की क्षमता वाले पिपेट का उपयोग करके 250 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित करें, वॉल्यूम को एसीटोनिट्राइल के साथ निशान पर लाएं। परिणामी समाधानों को मिश्रित किया जाता है और एक महीने से अधिक समय तक एक अंधेरी, ठंडी जगह पर संग्रहीत किया जाता है।

तालिका 2

समाधान प्रारंभिक समाधान की मात्रा, सेमी 3 अंशांकन समाधान में द्रव्यमान सांद्रता, µg/cm3 बेंज(ए)पाइरीन द्रव्यमान सांद्रता 100 μg/सेमी 3 बेंज (सी) क्रिसिन द्रव्यमान सांद्रता 10 μg/सेमी 3 बेंज(ए)पाइरीन बेंज (इन) क्रिसीन

5.3 परीक्षण प्रदर्शन

5.3.1 उत्पाद से बेंजो(ए)पाइरीन का पृथक्करण

10 ग्राम वजन वाले उत्पाद का एक नमूना 100 सेमी3 की क्षमता वाले गोल तले वाले या सपाट तले वाले फ्लास्क में रखा जाता है, और 92% एथिल अल्कोहल के 50 सेमी3 में 4 ग्राम पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड का घोल मिलाया जाता है। फ्लास्क की सामग्री को हिलाकर मिलाया जाता है। फ्लास्क को रिफ्लक्स कंडेनसर से जोड़ा जाता है और पानी के स्नान में या चुंबकीय स्टिरर पर गर्म किया जाता है, जबकि प्रतिक्रिया मिश्रण 3 घंटे तक उबलता रहता है। फिर रेफ्रिजरेटर के माध्यम से फ्लास्क में 100 सेमी 3 आसुत जल डाला जाता है। प्रतिक्रिया द्रव्यमान को कमरे के तापमान तक ठंडा किया जाता है। ठंडा होने के बाद, प्रतिक्रिया द्रव्यमान को 500 सेमी 3 की क्षमता वाले एक अलग फ़नल में स्थानांतरित किया जाता है। यदि हाइड्रोलिसिस के बाद प्रतिक्रिया द्रव्यमान में कोई ठोस अवशेष रहता है, तो इसे बुचनर फ़नल पर अलग किया जाता है, अवशेषों को 30 सेमी 3 गर्म एथिल अल्कोहल के साथ एक फिल्टर पर धोया जाता है। प्रतिक्रिया द्रव्यमान के तरल चरण का उपयोग निष्कर्षण के लिए किया जाता है। विभाजक फ़नल में 30 सेमी 3 एन हेक्सेन जोड़ा जाता है। फ़नल की सामग्री को हिलाया जाता है और तरल पदार्थ को अलग करने के लिए छोड़ दिया जाता है। यदि एक इमल्शन बनता है, तो एक अलग फ़नल में मिश्रण में 20 सेमी 3 एथिल अल्कोहल मिलाया जाता है। पृथक्करण के बाद, निचले जलीय-अल्कोहल चरण को फ्लास्क में डाला जाता है, और हेक्सेन अर्क को दूसरे पृथक्करणीय फ़नल में डाला जाता है। प्रतिक्रिया द्रव्यमान का यह उपचार दो बार और किया जाता है, निष्कर्षण के लिए 30 सेमी 3 एन.हेक्सेन और 20 सेमी 3 भागों में इमल्शन को अलग करने के लिए एथिल अल्कोहल का उपयोग किया जाता है।

निष्कर्षण के अंत में, संयुक्त हेक्सेन अर्क को एक अलग फ़नल में आसुत जल के साथ तीन बार, 30 सेमी 3 प्रत्येक में धोया जाता है, अर्क को 100 सेमी 3 की क्षमता वाले एक गोल-तले वाले फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, एक परत के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है एक झरझरा फिल्टर के साथ एक फ़नल पर निर्जल सोडियम सल्फेट का। घोल को 60 डिग्री सेल्सियस से अधिक के पानी के स्नान तापमान पर 50 सेमी 3 की मात्रा में एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता पर वाष्पित किया जाता है।

वाष्पीकृत अर्क को 500 सेमी 3 की क्षमता वाले एक अलग फ़नल में स्थानांतरित किया जाता है और डाइमिथाइलफॉर्मामाइड और पानी के मिश्रण का 50 सेमी 3, 9:1 के आयतन अनुपात में लिया जाता है, इसमें जोड़ा जाता है। मिश्रण को 1 मिनट के लिए जोर से हिलाया जाता है, चरण पृथक्करण के बाद, निचले हिस्से को 200 सेमी 3 की क्षमता वाले एक फ्लैट-तले वाले फ्लास्क में डाला जाता है, और डाइमिथाइलफोर्माइड और पानी का 50 सेमी 3 मिश्रण फिर से ऊपरी हेक्सेन परत से निकाला जाता है। . हेक्सेन परत को हटा दिया जाता है, एक सपाट तले वाले फ्लास्क में संयुक्त डाइमिथाइलफॉर्मामाइड अर्क को एक अलग फ़नल में स्थानांतरित किया जाता है, 100 सेमी 3 आसुत जल मिलाया जाता है और जलीय चरण से निष्कर्षण हेक्सेन के साथ तीन बार, 50 सेमी 3 प्रत्येक के साथ किया जाता है। जलीय चरण को हटा दिया जाता है, और हेक्सेन अर्क को तीन बार पानी से धोया जाता है, प्रत्येक 30 सेमी 3, एक फ्लैट-तले वाले फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, 10 ग्राम निर्जल सोडियम सल्फेट जोड़ा जाता है और एक घंटे के लिए छोड़ दिया जाता है, एन.हेक्सेन को वाष्पित किया जाता है 1.5 - 2.0 सेमी 3 की मात्रा के लिए एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता, शेष विलायक हटा दिया जाता है

गोस्ट आर 51650-2000

वॉटर-जेट पंप से जुड़े वैक्यूम क्लैंप के माध्यम से हवा के प्रवाह के साथ, फ्लास्क में अवशेष 0.5 सेमी 3 एथिल अल्कोहल में घुल जाता है।

(2.5 ± 0.2) ग्राम सेफैडेक्स एलएच-20 को 100 सेमी 3 की क्षमता वाले गिलास में तौला जाता है, 20 सेमी 3 एथिल अल्कोहल मिलाया जाता है और 3 - 4 घंटे के लिए फूलने के लिए छोड़ दिया जाता है। फिर जेल को स्थानांतरित किया जाता है, धोया जाता है अल्कोहल की थोड़ी मात्रा के साथ, एक ग्लास क्रोमैटोग्राफ़िक चैम्बर कॉलम में, विलायक को निकलने दें ताकि सॉर्बेंट परत के ऊपर अल्कोहल की परत कम से कम 2 मिमी बनी रहे। फ्लास्क से अर्क के शेष भाग को तैयार कॉलम पर पाइप से डाला जाता है, इसे फ्लास्क से 0.5 सेमी3 भागों में एथिल अल्कोहल से तीन बार धोया जाता है। बेंजो (ए) पाइरीन सहित पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन के स्तंभ से 40 सेमी 3 एथिल अल्कोहल के साथ निक्षालन किया जाता है, 12 सेमी 3 की मात्रा वाला पहला अंश त्याग दिया जाता है, और 25 सेमी की मात्रा वाला दूसरा अंश छोड़ दिया जाता है। 3 एकत्र किया गया है। ब्लोअर या गैस सिलेंडर से जुड़े नोजल के माध्यम से हवा या नाइट्रोजन की धारा के साथ थोड़ा अतिरिक्त दबाव बनाकर 0.5 सेमी 3/मिनट की विलायक निक्षालन दर प्राप्त की जाती है। गैस की आपूर्ति सिलिका जेल से भरी ग्लास ट्यूब के माध्यम से की जानी चाहिए।

सेफैडेक्स एलएच-20 कॉलम का बार-बार उपयोग किया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, अंशांकन के बाद शर्बत को सूखने की अनुमति दिए बिना, कॉलम को 25 सेमी 3 एथिल अल्कोहल से धोया जाता है और अगला नमूना लगाया जाता है।

दूसरे अंश के घोल को 50 सेमी 3 की क्षमता वाले नाशपाती के आकार के फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, विलायक को 0.5 - 1.0 सेमी 3 की मात्रा में वाष्पित किया जाता है, इसके अवशेषों को हवा या नाइट्रोजन की एक धारा में हटा दिया जाता है।

बेंजो (ए) पाइरीन युक्त परिणामी अंश का उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी या स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री का उपयोग करके आगे विश्लेषण किया जाता है।

उसी समय, एक नियंत्रण प्रयोग किया जाता है, जिसमें प्रक्रिया के अनुसार अभिकर्मकों का उपयोग करके विश्लेषण के सभी चरणों को पूरा किया जाता है, लेकिन उत्पाद का वजन किए बिना।

5.3.2 उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा बेंजो (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण

5.3.2.1 क्रोमैटोग्राफ़िक स्थितियाँ

उपयोग किए गए तरल क्रोमैटोग्राफ और क्रोमैटोग्राफ़िक कॉलम के प्रकार के आधार पर क्रोमैटोग्राफी स्थितियों का चयन किया जाता है।

उदाहरण के तौर पर, बेंजो(ए)पाइरीन के क्रोमैटोग्राफिक निर्धारण के लिए निम्नलिखित शर्तें दी जा सकती हैं।

फ्लोरोसेंट डिटेक्टर "क्रेटोस एफएस-970" के साथ तरल क्रोमैटोग्राफ "एआईएक्स-334"।

सुपेलकोसिल एलसी-पीएएम कॉलम, 5 माइक्रोन ग्रेन, 150 मिमी लंबा, 4.6 मिमी व्यास।

फ्लोरीमेट्रिक डिटेक्टर: उत्तेजना प्रकाश तरंग दैर्ध्य 300 एनएम, उत्सर्जन फिल्टर - 418 एनएम।

मोबाइल चरण: एसीटोनिट्राइल और पानी 8:2 के आयतन अनुपात में।

निक्षालन दर - 2.0 सेमी 3/मिनट।

इंजेक्ट किए गए नमूने की मात्रा 20 μl है।

एम्पलीफायर की संवेदनशीलता का चयन किया जाता है ताकि बेंजो (ए) पाइरीन और आंतरिक मानक, बेंजो (बी) क्रिसीन के संकेतों की तीव्रता, पैमाने के 95% से अधिक न हो।

विश्लेषण का समय - 15 मिनट; बेंजो(ए)पाइरीन का अवधारण समय 5 मिनट है, बेंजो(सी)क्रिसीन का अवधारण समय 13 मिनट है।

विश्लेषण किए गए समाधानों को समान परिस्थितियों में दो बार क्रोमैटोग्राफ किया जाता है। पीक क्षेत्रों को एक इंटीग्रेटर का उपयोग करके या मैन्युअल रूप से पीक ऊंचाई और इसकी आधी अधिकतम चौड़ाई के उत्पाद के रूप में मापा जाता है।

बेंजो(ए)पाइरीन सामग्री का निर्धारण आंतरिक मानक विधि या योज्य विधि का उपयोग करके किया जाता है।

5.3.2.2 आंतरिक मानक विधि का उपयोग करके 5.3.1 के अनुसार प्राप्त समाधान (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण

मात्रात्मक मूल्यांकन की इस पद्धति का उपयोग करते समय, क्रोमैटोग्राफ को पहले 5.2.5 के अनुसार तैयार किए गए अंशांकन समाधानों का उपयोग करके कैलिब्रेट किया जाता है।

5.3.2.1 में निर्दिष्ट शर्तों के तहत, प्रत्येक तैयार समाधान के लिए तीन क्रोमैटोग्राम रिकॉर्ड करें और बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(सी)क्रिसीन के चरम क्षेत्रों को मापें। तीन क्रोमैटोग्राम से गणना की गई बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(सी)क्रिसीन के शिखर क्षेत्र का अंकगणितीय माध्य मान निर्धारित किया जाता है।

अंशांकन गुणांक K की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है

जहां और और 2 बेंजो (ए) पाइरीन (/ एल]) और बेंजो (ए) क्रिसीन (टी 2) के द्रव्यमान हैं जो क्रोमैटोग्राफ, माइक्रोग्राम में पेश किए गए हैं; 5) और ^2 - बेंजो(ए)पाइरीन (.9]) और बेंजो(सी)क्रिसीन (ए^), सेमी 3 के चरम क्षेत्र।

प्रत्येक समाधान के लिए अंशांकन गुणांक K की गणना की जाती है।

इसका मान सभी परिणामों से अंशांकन गुणांक के अंकगणितीय माध्य मान से 10% से अधिक भिन्न नहीं होना चाहिए।

300 एनएम की उत्तेजना तरंग दैर्ध्य और 418 एनएम के उत्सर्जन फिल्टर के साथ, अंशांकन कारक 9.5 है।

विश्लेषण शुरू करने से पहले, क्षारीय हाइड्रोलिसिस के लिए नमूने तैयार करने के चरण में, 0.5 μg/cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (बी) क्रिसिन समाधान के 50 μl को उत्पाद नमूने और नियंत्रण प्रयोग नमूने में जोड़ा जाता है। दोनों नमूने 5.3.1 में निर्दिष्ट सभी परीक्षण चरणों से गुज़रे हैं। सूखा अवशेष 200 μl एसीटोनिट्राइल में घुल जाता है।

5.3.2.1 में निर्दिष्ट शर्तों के तहत, 100 μg/सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता वाले बेंजो(ए)पाइरीन के घोल और 100 μg/सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता वाले बेंजो(ए)क्राइसीन के घोल के क्रोमैटोग्राम रिकॉर्ड करें। बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(सी) क्रिसीन के रिलीज होने के समय पर ध्यान दें। फिर बेंजो (बी) क्रिसिन के साथ एक नियंत्रण नमूने के क्रोमैटोग्राम रिकॉर्ड करें और बेंजो (बी) क्रिसिन के समान मिश्रण के साथ एक उत्पाद के नमूने को रिकॉर्ड करें। बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(सी)क्रिसीन के शिखर क्षेत्रों को उत्पाद नमूने और नियंत्रण नमूने के क्रोमैटोग्राम पर मापा जाता है।

प्रत्येक नमूने के लिए, दो क्रोमैटोग्राम रिकॉर्ड किए जाते हैं। दो क्रोमैटोग्राम से, बेंजो(ए)पाइरीन और बेंजो(सी)क्रिसीन के शिखर क्षेत्रों के अंकगणितीय माध्य की गणना की जाती है।

प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान, μg, उत्पाद नमूना m\ और नियंत्रण प्रयोग नमूना m2 में निर्धारित किया जाता है।

“72 नियंत्रण नमूने में बेंजो(ए)पाइरीन का द्रव्यमान है, माइक्रोग्राम; टी सेंट उत्पाद नमूने और नियंत्रण नमूने, μg में पेश किए गए बेंज (सी) क्रिसिन का द्रव्यमान है;

एस"] और एस 2 - उत्पाद नमूने (.एस"]) और नियंत्रण नमूने (.एस/), सेमी 2 के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो (ए)पाइरीन के शिखर क्षेत्र;

एल/, एल/ - उत्पाद नमूने (.एसएस) और नियंत्रण नमूने (एल/), सेमी 2 के क्रोमैटोग्राम में बेंज (सी) क्रिसिन के शिखर क्षेत्र;

K 5.3.2.2 के अनुसार स्थापित अंशांकन गुणांक है।

5.3.2.3 योगात्मक विधि का उपयोग करके 5.3.1 के अनुसार प्राप्त घोल (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण

योगात्मक विधि का उपयोग करते समय मात्रात्मक मूल्यांकन के लिए, उत्पाद नमूने के साथ-साथ एक नियंत्रण नमूने का भी विश्लेषण किया जाता है। 5.3.1 के अनुसार उत्पाद के नमूनों और नियंत्रण प्रयोगों से अलग किए गए अंश 400 μl एसीटोनिट्राइल में घुल जाते हैं। परिणामी समाधानों को दो भागों में विभाजित किया जाता है, छोटे हिस्से (40 μl) को टेस्ट ट्यूब या नाशपाती के आकार के फ्लास्क में ले जाया जाता है।

उत्पाद के नमूने के क्रोमैटोग्राम, एक नियंत्रण प्रयोग के नमूने और 0.25 μg/सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता वाले बेंजो (ए) पाइरीन समाधान के क्रोमैटोग्राम को रिकॉर्ड करें। बेंजो(ए)पाइरीन के निकलने का समय नोट किया जाता है।

उत्पाद के नमूने और नियंत्रण प्रयोग (360 μl) के शेष हिस्सों में, 5 μg/cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन समाधान के 10 - 20 μl जोड़ें। परिणामी समाधानों को क्रोमैटोग्राफ में पुनः प्रस्तुत किया जाता है।

सभी क्रोमैटोग्राम दो बार रिकॉर्ड किए जाते हैं। बेंजो(ए)पाइरीन के शिखर क्षेत्रों को मापा जाता है। दो क्रोमैटोग्राम से बेंजो(ए)पाइरीन के शिखर क्षेत्र के अंकगणितीय माध्य की गणना की जाती है।

प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, बेंजो (ए) पाइरीन, μg का द्रव्यमान उत्पाद नमूना /77] और नियंत्रण नमूना टी 2 में निर्धारित किया जाता है:

टी ऑप ■ एस 1 . _ टी के ■ एस 3 (9)

एस 2 - 0.95) '2 5 4 - 0.95 3'

जहां /77 ऑप और /77 के उत्पाद नमूने (टी ऑप) और नियंत्रण नमूने (/%), μg से अर्क के हिस्से में जोड़ा गया बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान है;

एस"] और एस 2 - उत्पाद नमूने (.एस"]) के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो(ए)पाइरीन के शिखर क्षेत्र और बेंजो(ए)पाइरीन (एल/), सेमी 2 के योग के साथ उत्पाद का नमूना;

एल/ और.एस) - नियंत्रण प्रयोग नमूने (एल/) के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो(ए)पाइरीन के शिखर क्षेत्र और बेंजो(ए)पाइरीन (एल/), सेमी 2 के योग के साथ नियंत्रण प्रयोग नमूना;

0.9 उस नमूने का अनुपात है जिसमें बेंजो(ए)पाइरीन मिलाया जाता है।

5.3.3 कमरे के तापमान पर स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा बेंजो (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण

स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री द्वारा बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री का निर्धारण करते समय, उत्पाद के नमूने के साथ-साथ, नियंत्रण प्रयोग के एक नमूने का विश्लेषण किया जाता है, जिसमें 1 μg / की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन समाधान के 50 μl का विश्लेषण किया जाता है। सेमी 3 जोड़ा गया है।

उत्पाद के नमूने और एडिटिव के साथ नियंत्रण प्रयोग के नमूने से 5.3.1 के अनुसार प्राप्त बेंजो (ए) पाइरीन युक्त अंशों को बेंजीन के 0.5 सेमी 3 में घोल दिया जाता है और फिर एसिटिलेटेड सेलूलोज़ की एक पतली परत में अतिरिक्त शुद्धिकरण के अधीन किया जाता है।

ऐसा करने के लिए, 5.2.2 में बताए अनुसार तैयार की गई 20 x 20 सेमी की प्लेट को दो क्षेत्रों में विभाजित किया गया है: एक साइड वाला, 1.5 - 2 सेमी चौड़ा, और एक मुख्य, जिसमें सॉर्बेंट परत के साथ एक विभाजन पट्टी खींची जाती है। स्केलपेल या पतला स्पैटुला। 5.3.1 के अनुसार अलग किए गए अंश का एक समाधान एक सतत पट्टी में मुख्य क्षेत्र पर लगाया जाता है, प्लेट के निचले किनारे से 2 सेमी और साइड किनारों से 1 सेमी। घोल को पतली खींची गई केशिका या माइक्रोसिरिंज का उपयोग करके लगाया जाता है; धब्बों का आकार 5 मिमी से अधिक नहीं होना चाहिए। पदार्थ के मात्रात्मक हस्तांतरण के लिए, इसे बेंजीन (0.4 - 0.6 सेमी 3) की थोड़ी मात्रा के साथ फ्लास्क की दीवारों से दो बार धोया जाता है। साइड फ़ील्ड की प्रारंभिक रेखा पर, 1 μg/cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन के घोल का 5 μl एक बिंदु पर लगाया जाता है। विलायक के पूर्ण वाष्पीकरण के बाद, प्लेट को 70° - 85° के कोण पर एक पूर्व-संतृप्त क्रोमैटोग्राफिक कक्ष में रखा जाता है और 60 के अनुपात में लिए गए एथिल अल्कोहल, एसीटोन और पानी के मिश्रण में निक्षालन किया जाता है: 25:15. जब विलायक अग्र भाग प्लेट के ऊपरी किनारे से 2 सेमी तक पहुंच जाता है, तो इसे कक्ष से हटा दिया जाता है, हवा में सुखाया जाता है, और बेंजो (ए) पाइरीन के क्रोमैटोग्राफिक क्षेत्र को एक पराबैंगनी विकिरणक लैंप के नीचे उजागर किया जाता है। मुख्य क्षेत्र से बेंजो (ए) पाइरीन ज़ोन से सॉर्बेंट को एक स्केलपेल या एक पतले स्पैटुला का उपयोग करके प्लेट से निकाला जाता है और एक ग्लास फिल्टर में स्थानांतरित किया जाता है, जहां से पदार्थ को 50 सेमी 3 बेंजीन के साथ कई चरणों में फ्लास्क में निक्षालित किया जाता है। 100 सेमी 3 की क्षमता के साथ, फिर विलायक को एक छोटी मात्रा में वाष्पित किया जाता है, शेष विलायक को हवा की धारा के साथ हटा दिया जाता है और 1 सेमी 3 बेंजीन को फ्लास्क में जोड़ा जाता है।

60 एनएम/मिनट की स्कैनिंग गति पर 400 - 440 एनएम रेंज में 386 एनएम की एक रोमांचक प्रकाश तरंग दैर्ध्य के साथ एक स्पेक्ट्रोफ्लोरीमीटर का उपयोग करके, एक उत्पाद नमूने के प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रा और बेंजो (ए) पाइरीन के अतिरिक्त एक नियंत्रण नमूने को रिकॉर्ड किया जाता है। .

समाधानों के स्पेक्ट्रा को एक प्रवर्धन मोड में रिकॉर्ड किया जाता है, नियंत्रण नमूना समाधान के अनुसार अंतराल और लाभ कारक को समायोजित किया जाता है ताकि 406 एनएम पर बेंजो (ए) पाइरीन का संकेत उपकरण पैमाने का 0.4 - 0.6 हो। प्रत्येक समाधान के लिए, स्पेक्ट्रम को दो बार रिकॉर्ड किया जाता है, जिससे अच्छी प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता प्राप्त होती है। अधिकतम 406 एनएम पर परिणामी स्पेक्ट्रोग्राम पर, उत्पाद नमूने और नियंत्रण नमूने के लिए बेंजो (ए) पाइरीन की वर्णक्रमीय रेखा की ऊंचाई मिलीमीटर में मापी जाती है। बेंजो(ए)पाइरीन ऊंचाई के औसत मूल्य की गणना दो स्पेक्ट्रोग्राम के डेटा से की जाती है। उत्पाद में बेंजो (ए) पाइरीन के उच्च स्तर पर, नमूनों को बेंजीन से पतला किया जाता है और स्पेक्ट्रम को फिर से नियंत्रण नमूने के समान प्रवर्धन मोड में दर्ज किया जाता है।

दो समानांतर निर्धारण किये जाते हैं।

5.4 प्रसंस्करण परिणाम

5.4.1 उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी विधि का उपयोग करते समय उत्पाद X\,%, या X 2, mg/kg में बेंजो(ए)पाइरीन के द्रव्यमान अंश की गणना सूत्रों का उपयोग करके की जाती है:

(टी 1 - टी 2) ■ 100 (टी जी - टी 2) टी ■ 1000 1000 "टी 10

जहां mi उत्पाद के नमूने में बेंजो(ए)पाइरीन का द्रव्यमान है, μg;

एम2 नियंत्रण नमूने में बेंजो(ए)पाइरीन का द्रव्यमान है, μg; t विश्लेषण के लिए लिए गए उत्पाद का द्रव्यमान है, g.

5.4.2 स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री विधि का उपयोग करते समय उत्पाद ए), %, या एक्स 2, मिलीग्राम/किग्रा में बेंजो (ए) पाइरीन का द्रव्यमान अंश, सूत्रों का उपयोग करके गणना की जाती है:

एस सेंट एनयू- 100 एस एसटी // वी टी ■ 1000 ■ 1000 ■

जहां c st 5.2.4 के अनुसार तैयार किए गए कार्यशील घोल में बेंजो(ए)पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता है और नियंत्रण नमूने में जोड़ा गया है, μg/cm 3;

उत्पाद नमूने के स्पेक्ट्रोग्राम पर बेंजो(ए)पाइरीन की वर्णक्रमीय रेखा की ऊंचाई, मिमी; नियंत्रण नमूने के स्पेक्ट्रोग्राम पर बेंजो(ए)पाइरीन की वर्णक्रमीय रेखा की ऊंचाई, मिमी;

वी नियंत्रण नमूने में जोड़े गए बेंजो (ए) पाइरीन कार्यशील समाधान की मात्रा है, सेमी 3; t परीक्षण के लिए लिए गए उत्पाद के नमूने का द्रव्यमान है, g.

अंतिम परीक्षण परिणाम को समान संख्या में महत्वपूर्ण अंकों के साथ दो समानांतर निर्धारणों के अंकगणितीय माध्य के रूप में लिया जाता है।

यदि समानांतर निर्धारण के परिणामों के बीच विसंगति \X-y - YG 2 | से अधिक नहीं है<

< 0,01 dX, где, Х 2 и X- результаты параллельных определений и их среднее арифметическое, а d - норматив контроля сходимости, то среднее арифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива d приведено в таблице 3.

विश्लेषण X के प्राप्त परिणाम और तालिका 3 में दिए गए सापेक्ष त्रुटि d के मान के आधार पर, पूर्ण त्रुटि A = 0,(ШХ

विश्लेषण का परिणाम (X± A), mg/kg या % P = 0.95 पर प्रस्तुत किया गया है।

5.5 विश्लेषण परिणामों की सटीकता की निगरानी करना

5.5.1 प्रत्येक विश्लेषण किए गए नमूने के लिए समानांतर निर्धारण का अभिसरण 5.3 के अनुसार नियंत्रित किया जाता है।

5.5.2 पुनरुत्पादन नियंत्रण करने के लिए, कार्यशील नमूनों का उपयोग किया जाता है। नमूने को दो समान भागों में विभाजित किया जाता है और अलग-अलग प्रयोगशालाओं में या एक ही प्रयोगशाला में पद्धति के अनुसार विश्लेषण किया जाता है, विश्लेषण की स्थितियों को यथासंभव अलग-अलग किया जाता है, यानी, कांच के बने पदार्थ को मापने के विभिन्न सेटों का उपयोग किया जाता है, विश्लेषण अलग-अलग दिनों में किया जाता है या दो अलग-अलग विश्लेषकों द्वारा।

नियंत्रण विश्लेषण की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता को संतोषजनक माना जाता है यदि \X-y - X 2\<

< 0,01 DX, где Л), Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднее арифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 3.

प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता नियंत्रण की आवृत्ति - हर दो सप्ताह में कम से कम एक बार

तालिका 3 - माप सीमा, सापेक्ष त्रुटि विशेषता का मान और पी = 0.95 की आत्मविश्वास संभावना के साथ सापेक्ष त्रुटि (पुनरुत्पादन और पुनरुत्पादन) के यादृच्छिक घटक के परिचालन नियंत्रण के लिए मानक

5.5.3 सटीकता को नियंत्रित करने के लिए, बेंजो(ए)पाइरीन के ज्ञात योग के साथ कार्यशील नमूनों का उपयोग करें। नमूने को दो समान भागों में विभाजित किया गया है, जिनमें से पहले का प्रक्रिया के अनुसार विश्लेषण किया जाता है, और दूसरे में बेंजो (ए) पाइरीन का एक ज्ञात योजक जोड़ा जाता है और फिर प्रक्रिया के अनुसार विश्लेषण भी किया जाता है। विश्लेषण किए गए नमूने में एडिटिव की मात्रा बेंजोपाइरीन सामग्री का 50 - 150% होनी चाहिए।

नियंत्रण विश्लेषण की सटीकता संतोषजनक मानी जाती है यदि |ए) - एक्स-सी\< К, где Л), X и с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена соответственно; К - норматив оперативного контроля точности.

एक पीसी पर FSUE "STANDARTINFORM" में टाइप किया गया।

FSUE की शाखा में मुद्रित "STANDARTINFORM" - प्रकार। "मॉस्को प्रिंटर", 105062 मॉस्को, लायलिन लेन, 6

गोस्ट आर 51650-2000

1 उपयोग का क्षेत्र................................................. ........... 1

3 नमूनाकरण................................................. ........ ................ 2

4 निम्न-तापमान स्पेक्ट्रोफ्लोरीमेट्री विधि............................................ ..2

4.1 उपकरण, सामग्री और अभिकर्मक................................................... ........2

4.2 परीक्षण के लिए तैयारी................................................. ....... ...3

4.3 परीक्षण निष्पादन................................................... ................................... 3

4.4 परिणामों का प्रसंस्करण...................................................... ...... ....6

4.5 विश्लेषण परिणामों की सटीकता की निगरानी................................................... .........6

उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी और स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री के 5 तरीके

कमरे का तापमान................................................ ........ ...... 7

5.1 उपकरण, सामग्री और अभिकर्मक................................................... ........8

5.2 परीक्षण के लिए तैयारी................................................. ....... ...9

5.3 परीक्षण निष्पादन................................................... ................... ....10

5.4 प्रसंस्करण परिणाम.................................................. ................... ....13

5.5 विश्लेषण परिणामों की सटीकता की निगरानी................................................... .........14

6 सुरक्षा आवश्यकताएँ.................................................................. ................... 15

ऑपरेटर योग्यता के लिए 7 आवश्यकताएँ................................................. ......15

परिशिष्ट ए ग्रंथ सूची

रूसी संघ का राज्य मानक

खाद्य उत्पाद बेंजो(ए)पाइरीन के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने की विधियाँ

कुल द्रव्यमान के बेंज(ए)पाइरेन अंश के निर्धारण की विधियाँ

परिचय की तिथि 2001-07-01

1 उपयोग का क्षेत्र

यह मानक खाद्य कच्चे माल, खाद्य उत्पादों, भोजन और स्वाद देने वाले योजकों पर लागू होता है और कम और कमरे के तापमान पर स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री और उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का उपयोग करके बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश को निर्धारित करने के तरीकों को स्थापित करता है।

500 ग्राम की सबसे बड़ी वजन सीमा के साथ द्वितीय सटीकता वर्ग के सामान्य प्रयोजन प्रयोगशाला तराजू गोस्ट 24104.

रोटरी बाष्पीकरणकर्ता IR-1M।

पानी का स्नान।

एक बंद सर्पिल और एक हीटिंग नियामक के साथ घरेलू इलेक्ट्रिक स्टोव गोस्ट 14919.

किसी भी क्षमता के तरल नाइट्रोजन के लिए देवर पोत

क्रोमैटोग्राफी के लिए स्नान (एनामेल्ड फोटो क्यूवेट्स)।

15 x 30 और 20 x 40 सेमी मापने वाली ग्लास प्लेटें।

फ्लास्क K-1-250-29/32 TCS, K-1-100-29/32 TCS, K-1-500-29/32 TCS या P-1-500-29/32 TCS के अनुसार गोस्ट 25336.

रेफ्रिजरेटर HIT-1-300-14/23 HS या HIT-1-400-14/23 HS के अनुसार गोस्ट 25336.

रेफ्रिजरेटर KhPT-2-400-29/32 HS और KhPT-1-300-29/32 या KhPT-400-29/32 HS गोस्ट 25336.

डिफ्लेग्मेटर 250-19/26-29/32 टीएस या रिफ्लक्स कंडेनसर 300-19/26-29/32 टीएस के अनुसार गोस्ट 25336.

ग्लास टेस्ट ट्यूब P2-10-180 HS गोस्ट 25336.

नोजल पी-1-19/26-14/23 टीएस या एन2-19/23 गोस्ट 25336.

प्रयोगशाला जल जेट पंप गोस्ट 25336.

1, 2, 5, 10 सेमी 3 की क्षमता वाले पिपेट गोस्ट 29228और गोस्ट 29229.

फ़नल वीएफओ-32-पीओआर 100-14/23 एचएस या वीएफओ-32-पीओआर 160-14/23 एचएस के अनुसार गोस्ट 25336.

मापने वाली ट्यूब पी-2-15-14/23 एचएस गोस्ट 1770.

पृथक्करण फ़नल VD-1-500 या VD-3-500 गोस्ट 25336.

ग्रेजुएटेड सिलेंडर 1-100, 1-250 या 3-100, 3-250 गोस्ट 25336.

वज़न कप (बग) SV-14/8, या SV-19/9, या SV-24/10, या SV-34/12 गोस्ट 25336.

1 डिग्री सेल्सियस के विभाजन मूल्य के साथ 0-250 डिग्री सेल्सियस की तापमान माप सीमा वाला थर्मामीटर गोस्ट 29224.

कांच की केशिकाएं, कांच की छड़ें।

n.ऑक्टेन, एच., नियामक दस्तावेज़ के अनुसार।

n.hexane, h., नियामक दस्तावेज़ के अनुसार।

संशोधित तकनीकी एथिल अल्कोहल गोस्ट 18300या रेक्टिफाइड एथिल अल्कोहल गोस्ट आर 51652.

नियामक दस्तावेज़ के अनुसार पेट्रोलियम ईथर अंश 40 - 70 डिग्री सेल्सियस।

क्रोमैटोग्राफी के लिए एल्यूमिनियम ऑक्साइड, नियामक दस्तावेज़ के अनुसार गतिविधि स्तर 2।

बेंज(ए)पाइरीन, मुख्य पदार्थ की सामग्री 98% से कम नहीं है।

1,12-बेंज़पेरिलीन, मुख्य पदार्थ की सामग्री 98% से कम नहीं है।

इसे मेट्रोलॉजिकल विशेषताओं वाले अन्य माप उपकरणों और तकनीकी विशेषताओं वाले उपकरणों के साथ-साथ निर्दिष्ट से कम गुणवत्ता वाले अभिकर्मकों और सामग्रियों का उपयोग करने की अनुमति है।

4.2 परीक्षण के लिए तैयारी

4.2.1 सफाई सॉल्वैंट्स

सॉल्वैंट्स (एन.ऑक्टेन, एथिल अल्कोहल, पेट्रोलियम ईथर, क्लोरोफॉर्म और एन.हेक्सेन) को रिफ्लक्स कंडेनसर के साथ पारंपरिक तरीके से आसुत किया जाता है।

4.2.2 एल्युमिना तैयार करना

एल्युमीनियम ऑक्साइड को ओवन में (250+4) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 4 घंटे तक सुखाया जाता है और ग्राउंड स्टॉपर वाले बर्तन में संग्रहित किया जाता है।

4.2.3 पतली परत क्रोमैटोग्राफी (साक्षी समाधान) के लिए बेंजो (ए) पाइरीन समाधान की तैयारी।

लगभग 10 मिलीग्राम बेंजो (ए) पाइरीन को एक बीकर में तौला जाता है, और नमूना पूरी तरह से घुलने तक कुछ मिलीलीटर पेट्रोलियम ईथर मिलाया जाता है।

परिणामी घोल को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है और घोल की मात्रा को पेट्रोलियम ईथर के साथ निशान पर समायोजित किया जाता है। समाधान को रेफ्रिजरेटर में तीन महीने से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जा सकता है।

4.2.4 बेंजो(ए)पाइरीन मानक घोल तैयार करना

(10.0 ± 0.2) मिलीग्राम बेंजो(ए)पाइरीन को एक बीकर में तौला जाता है, और नमूना पूरी तरह से घुलने तक कई मिलीलीटर एन ऑक्टेन मिलाया जाता है। परिणामी घोल को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड-इन स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है और एन.ऑक्टेन के साथ निशान पर समायोजित किया जाता है। परिणामी घोल में बेंजो(ए)पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता 100 μg/cm 3 है। घोल को रेफ्रिजरेटर में संग्रहित किया जाता है। समाधान का शेल्फ जीवन तीन महीने से अधिक नहीं है।

4.2.5 बेंजो(ए)पाइरीन के कार्यशील समाधान तैयार करना

बेंजो(ए)पाइरीन द्रव्यमान सांद्रता 0.1 का कार्यशील समाधान; 0.04 और 0.02 μg/सेमी 3 एन में। ऑक्टेन 4.2.4 के अनुसार तैयार बेंजो (ए) पाइरीन के मूल मानक समाधान के क्रमिक कमजोर पड़ने से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में तैयार किया जाता है। समाधान रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किए जाते हैं। समाधान का शेल्फ जीवन एक महीने से अधिक नहीं है।

4.2.6 1,12-बेंज़पेरिलीन मानक समाधान (आंतरिक मानक) की तैयारी

प्रारंभिक समाधान तैयार करने के लिए, (10.0 + 0.2) मिलीग्राम 1,12-बेंज़पेरिलीन को एक वजन वाली बोतल में तौला जाता है, और नमूना पूरी तरह से घुलने तक कुछ मिलीलीटर एन ऑक्टेन मिलाया जाता है। परिणामी घोल को मात्रात्मक रूप से 100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड-इन स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है और एन.ऑक्टेन के साथ निशान पर समायोजित किया जाता है। परिणामी घोल में 1,12-बेंज़पेरिलीन की द्रव्यमान सांद्रता 100 μg/cm 3 है। घोल को रेफ्रिजरेटर में संग्रहित किया जाता है। समाधान का शेल्फ जीवन तीन महीने से अधिक नहीं है।

4.2.7 1,12-बेंज़पेरिलीन (आंतरिक मानक समाधान) के कार्यशील समाधान की तैयारी

1,12-बेंज़पेरिलीन द्रव्यमान सांद्रता 0.01 के कार्यशील समाधान; 0.005; 0.002 और 0.001 μg/cm3

100 सेमी 3 की क्षमता वाले ग्राउंड स्टॉपर के साथ वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में, 4.2.6 के अनुसार तैयार किए गए मूल मानक समाधान के क्रमिक कमजोर पड़ने से एन.ऑक्टेन में तैयार किया गया। समाधान रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किए जाते हैं। समाधान का शेल्फ जीवन एक महीने से अधिक नहीं है।

4.3 परीक्षण प्रदर्शन

4.3.1 उत्पाद से बेंजो(ए)पाइरीन का पृथक्करण

25 ग्राम वजन वाले उत्पाद का एक नमूना 500 सेमी 3 की क्षमता वाले गोल तले वाले फ्लास्क में रखा जाता है, फ्लास्क में 20 सेमी 3 आसुत जल, 200 सेमी 3 एथिल अल्कोहल और 20 ग्राम पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड मिलाया जाता है।

फ्लास्क की सामग्री को हिलाकर मिलाया जाता है। फ्लास्क को रिफ्लक्स कंडेनसर से जोड़ा जाता है और पानी के स्नान में गर्म किया जाता है, जबकि प्रतिक्रिया मिश्रण 3 घंटे तक उबलता रहता है। फिर रेफ्रिजरेटर के माध्यम से फ्लास्क में 150 सेमी 3 पानी डाला जाता है; फ्लास्क को स्नान से हटा दिया जाता है और कमरे के तापमान तक ठंडा कर दिया जाता है।

ठंडा होने के बाद, प्रतिक्रिया मिश्रण के तरल चरण को निस्तारण द्वारा एक पृथक्करणीय फ़नल में स्थानांतरित किया जाता है, जिससे उत्पाद का शेष भाग फ्लास्क में रह जाता है। एन हेक्सेन के 150 सेमी 3 को अवशेषों के साथ फ्लास्क में जोड़ा जाता है, फ्लास्क की सामग्री को सख्ती से हिलाया जाता है और एन हेक्सेन को एक अलग फ़नल में निथारित किया जाता है।

फ़नल को ढक दिया जाता है और ज़ोर से हिलाया जाता है, फिर एक स्टैंड में सुरक्षित किया जाता है और तरल पदार्थों को अलग करने के लिए छोड़ दिया जाता है। परिणामी इमल्शन को अलग करने के लिए, एक अलग फ़नल में मिश्रण में 20 सेमी 3 एथिल अल्कोहल मिलाया जाता है। अलग होने के बाद, निचले जलीय-अल्कोहल चरण को तलछट के साथ फ्लास्क में वापस डाला जाता है, और हेक्सेन अर्क को 500 सेमी 3 की क्षमता वाले फ्लास्क में डाला जाता है।

प्रतिक्रिया मिश्रण का यह उपचार दो बार और किया जाता है, जिसमें निष्कर्षण के लिए 100 सेमी 3 एन.हेक्सेन और इमल्शन को अलग करने के लिए एथिल अल्कोहल का उपयोग किया जाता है, प्रत्येक 20 सेमी 3 के भागों में।

निष्कर्षण के अंत में, फ्लास्क में मौजूद अवशेष और हाइड्रोलाइज़ेट को हटा दिया जाता है, और अर्क को एक अलग फ़नल में आसुत जल के साथ तीन बार, 50 सेमी 3 प्रत्येक में धोया जाता है, और एक गोल-तले वाले फ्लास्क में भागों में वाष्पित किया जाता है। 250 सेमी 3 की क्षमता, पानी के स्नान के तापमान पर एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता पर दूसरे दशमलव स्थान पर पहले से तौला गया। 60 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं। विलायक के निशान को हटाने के लिए अर्क के साथ फ्लास्क को धूआं हुड में छोड़ दिया जाता है, और फिर फिर से तौला जाता है। वज़न के बीच के अंतर का उपयोग पृथक अर्क के द्रव्यमान को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

फ्लास्क में मौजूद अर्क में से 1/5 भाग बिना तौले बीकर में निकाल लें। बचे हुए अर्क वाले फ्लास्क को तौला जाता है। अर्क के भाग वाली बोतल में 4.2.3 के अनुसार तैयार बेंजो(ए)पाइरीन के "साक्षी" घोल का 0.1-0.2 सेमी 3 मिलाएं। बोतल की सामग्री और फ्लास्क में बचे अवशेष को थोड़ी मात्रा में पेट्रोलियम ईथर में घोल दिया जाता है।

अर्क के क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण के लिए, एल्यूमीनियम ऑक्साइड को 20x40 सेमी मापने वाली कांच की प्लेट पर समान रूप से डाला जाता है। फिर, 1 मिमी मोटे और 3 मिमी चौड़े रबर के छल्ले के साथ तीन भागों (14, 1 और 3 सेमी) में विभाजित कांच की छड़ का उपयोग करके, एल्यूमीनियम ऑक्साइड को सावधानीपूर्वक समतल किया जाता है।

परिणामी समाधानों को कांच केशिकाओं का उपयोग करके तैयार प्लेट पर मात्रात्मक रूप से लागू किया जाता है: संकीर्ण भाग पर - बोतल से समाधान ("गवाह"), चौड़े भाग पर - फ्लास्क से उत्पाद अर्क। घोल को प्लेट के निचले किनारे से 7-8 सेमी की दूरी पर एक सतत पट्टी में समान रूप से लगाया जाता है।

प्लेट को क्रोमैटोग्राफी स्नान में 20° - 25° के मामूली कोण पर रखा जाता है, पेट्रोलियम ईथर डाला जाता है ताकि यह नमूना अनुप्रयोग लाइन तक न पहुंचे। स्नान को कांच से ढक दिया जाता है और क्रोमैटोग्राफी की जाती है, जिससे विलायक को प्लेट के ऊपरी किनारे पर लाया जाता है।

प्लेट को सुखाए बिना, इसे पराबैंगनी प्रकाश से विकिरणित किया जाता है और परीक्षण नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन का स्थान चमकदार "साक्षी" पट्टी द्वारा निर्धारित किया जाता है। परीक्षण नमूने के क्रोमैटोग्राम पर बेंजो(ए)पाइरीन बैंड की सीमाओं को चिह्नित करें। प्लेट को धूएँ वाले हुड में हवा में सुखाया जाता है।

परीक्षण नमूने के क्रोमैटोग्राम पर अंकित एल्यूमीनियम ऑक्साइड की पट्टी को ग्लास स्लाइड का उपयोग करके प्लेट से हटा दिया जाता है और मात्रात्मक रूप से फ़िल्टर फ़नल की छिद्रित प्लेट में स्थानांतरित कर दिया जाता है। फ़नल को 100 सेमी 3 की क्षमता वाले एक गोल-तले वाले फ्लास्क से जोड़ा जाता है और बेंज़ो (ए) पाइरीन को 50 सेमी 3 बेंजीन के साथ एल्यूमीनियम ऑक्साइड से निकाला जाता है, छोटे भागों में बेंजीन मिलाया जाता है और एक छड़ी के साथ फ़नल पर एल्यूमिना को हिलाया जाता है। . बेंजीन को 60 डिग्री सेल्सियस से अधिक के जल स्नान तापमान पर एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता पर सूखने के लिए वाष्पित किया जाता है। फ्लास्क में अवशेष को मात्रात्मक रूप से ऑक्टेन के साथ एक टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित किया जाता है। परखनली में घोल की मात्रा 5 सेमी3 से अधिक नहीं होनी चाहिए।

कुछ उत्पादों का विश्लेषण करते समय, उत्पाद से पृथक अर्क की प्रारंभिक क्रोमैटोग्राफी के दौरान नमूने के फ्लोरोसेंट घटकों का कोई पूर्ण और स्पष्ट पृथक्करण नहीं होता है। इस मामले में, एल्यूमीनियम ऑक्साइड की एक चौड़ी पट्टी को "साक्षी" स्तर पर प्लेट पर अलग किया जाता है; जैसा कि ऊपर वर्णित है, बेंज (ए) पाइरीन को एल्यूमिना से बेंजीन के साथ निक्षालित किया जाता है, और वाष्पीकरण के बाद अवशेष एथिल अल्कोहल में घुल जाता है और परिणामस्वरूप अल्कोहल अर्क को फिर से क्रोमैटोग्राफ किया जाता है।

अल्कोहल अर्क के क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण के लिए, 0.3 मिमी मोटाई की एल्यूमीनियम ऑक्साइड की परत के साथ 15 x 30 सेमी मापने वाली प्लेट का उपयोग किया जाता है। 10 और 3 सेमी चौड़ी दो स्ट्रिप्स को प्लेट पर अलग किया जाता है। विश्लेषण किए गए उत्पाद का अल्कोहलिक अर्क एक ग्लास केशिका का उपयोग करके प्लेट के चौड़े हिस्से पर लगाया जाता है; पेट्रोलियम ईथर में बेंजो (ए) पाइरीन का एक घोल ("गवाह") घोल) को संकीर्ण भाग पर लगाया जाता है। प्लेट को स्नान में 20 - 25° के कोण पर रखा जाता है और क्लोरोफॉर्म में क्रोमैटोग्राफी की जाती है, जिससे विलायक को प्लेट के ऊपरी किनारे पर लाया जाता है। पराबैंगनी प्रकाश में, अध्ययन के तहत उत्पाद के बेंजो (ए) पायरीन के साथ एल्यूमीनियम ऑक्साइड की एक "गवाह" पट्टी नोट की जाती है। फिर बेंज़ (ए) पाइरीन को एल्यूमिना से बेंजीन के साथ मिलाया जाता है और आगे के सभी ऑपरेशन ऊपर बताए अनुसार किए जाते हैं।

गोस्ट आर 51650-2000

एन.ऑक्टेन में बेंजो(ए)पाइरीन का घोल एक परखनली में स्थानांतरित किया जाता है। 25 ग्राम उत्पाद के प्रारंभिक नमूने के साथ समाधान की मात्रा 5 सेमी3 से अधिक नहीं होनी चाहिए।

परिणामी घोल (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री मात्रात्मक मूल्यांकन के लिए एडिटिव विधि या आंतरिक मानक विधि का उपयोग करके कम तापमान स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री द्वारा निर्धारित की जाती है।

4.3.2 योगात्मक विधि का उपयोग करके 4.3.1 के अनुसार प्राप्त समाधान (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण।

एन.ऑक्टेन में बेंजो(ए)पाइरीन के परिणामी घोल का 1 सेमी 3 पिपेट तीन परखनलियों में डालें। फिर पहली टेस्ट ट्यूब में 2 सेमी 3 एन ऑक्टेन डाला जाता है। एन ऑक्टेन के 1.5 सेमी 3 और 4.2.5 के अनुसार तैयार किए गए 0.1 μg/सेमी 3 की द्रव्यमान सांद्रता के साथ बेंजो (ए) पाइरीन के कार्यशील घोल के 0.5 सेमी 3 को दूसरी टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है। एन ऑक्टेन का 1 सेमी 3 और बेंजो (ए) पाइरीन के समान कार्यशील घोल का 1 सेमी 3 दूसरे टेस्ट ट्यूब की तरह तीसरी टेस्ट ट्यूब में मिलाया जाता है।

स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्रिक विश्लेषण तीसरी ट्यूब से शुरू होता है। ऐसा करने के लिए, तीसरी टेस्ट ट्यूब को स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के प्रवेश द्वार के सामने तरल नाइट्रोजन के साथ एक देवार फ्लास्क में रखा जाता है; बेंजो(ए)पाइरीन की एक विश्लेषणात्मक प्रतिदीप्ति रेखा 403 एनएम पर 367 एनएम की रोमांचक प्रकाश तरंग दैर्ध्य पर स्थापित की गई है। लाभ को समायोजित करके और स्लिट को खोलकर, साथ ही साथ देवर पोत में टेस्ट ट्यूब के समायोजन से, स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के रिकॉर्डिंग डिवाइस द्वारा अधिकतम सिग्नल प्राप्त किया जाता है (50 - 80% तक), जिसके बाद बेंजो का एक स्पेक्ट्रोग्राम (ए)पाइरीन को 401 - 404 एनएम के क्षेत्र में रिकॉर्ड किया जाता है, जो 401 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर रिकॉर्डिंग डिवाइस स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का मान तय करता है। स्पेक्ट्रम रिकॉर्डिंग दो बार दोहराई जाती है।

फिर दूसरी और पहली ट्यूबों को क्रमिक रूप से तरल नाइट्रोजन में जमाया जाता है और प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रा को तरंग दैर्ध्य रेंज 401 - 404 एनएम में दर्ज किया जाता है, जिससे यह सुनिश्चित हो जाता है कि रिकॉर्डर पेन को 401 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर उसी स्थिति में रखा जाए जैसे कि नमूने को स्कैन करते समय तीसरी ट्यूब.

विश्लेषण किए गए अर्क में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता एक ग्राफ से निर्धारित की जाती है, जिस पर बेंजो (ए) पाइरीन एडिटिव (μg) का मान एब्सिस्सा अक्ष के साथ प्लॉट किया जाता है, और विशेषता के शिखर की ऊंचाई अधिकतम होती है 403 एनएम पर बेंजो (ए) पाइरीन की रेखा को ऑर्डिनेट अक्ष के साथ प्लॉट किया जाता है, जिसे मिलीमीटर में प्राप्त स्पेक्ट्रोग्राम से मापा जाता है।

यदि परीक्षण समाधान में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता माप के लिए उपयुक्त क्षेत्र के भीतर आती है, तो प्राप्त प्रयोगात्मक बिंदु एक ही सीधी रेखा पर स्थित होते हैं। इस सीधी रेखा को एक्स-अक्ष के साथ प्रतिच्छेदन तक एक्सट्रपलेशन करने से इस पर एक खंड मिलता है जो बिना किसी योगात्मक घोल में बेंजो (ए) पाइरीन की सामग्री के अनुरूप होता है, यानी, अध्ययन के तहत घोल के 1 सेमी 3 में। यदि विश्लेषण किए गए घोल में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता डिवाइस द्वारा मापी गई सांद्रता की सीमा की ऊपरी सीमा से अधिक है, तो विश्लेषण किया गया घोल एन.ऑक्टेन से पतला होता है।

4.3.3 आंतरिक मानक विधि का उपयोग करके 4.3.1 के अनुसार प्राप्त समाधान (अर्क) में बेंजो (ए) पाइरीन सामग्री का निर्धारण

1,12-बेंज़पेरिलीन का उपयोग आंतरिक मानक के रूप में किया जाता है। 4.3.1 के अनुसार प्राप्त एन.ऑक्टेन में बेंजो(ए)पाइरीन के 3 सेमी 3 घोल को एक परखनली में डाला जाता है और स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के प्रवेश द्वार के सामने तरल नाइट्रोजन के साथ एक देवार फ्लास्क में रखा जाता है, विश्लेषणात्मक रेखा 367 एनएम की एक रोमांचक प्रकाश तरंग दैर्ध्य पर 403 एनएम पर सेट की गई है और तरंग दैर्ध्य रेंज 401 - 409 एनएम में समाधान के स्पेक्ट्रम को रिकॉर्ड कर रही है। रेखा की तीव्रता (403 एनएम पर बेंजो(ए)पाइरीन की अधिकतम विशेषता रेखा के शिखर की ऊंचाई) का उपयोग नमूने में बेंजो(ए)पाइरीन की अनुमानित सामग्री का अनुमान लगाने के लिए किया जाता है। इस मूल्यांकन के अनुसार, 1,12-बेंज़पेरिलीन के घोल को एन.ऑक्टेन में बेंजो (ए) पाइरीन के 3 सेमी 3 घोल के साथ एक परखनली में इतनी मात्रा में मिलाया जाता है कि नमूने के स्पेक्ट्रम में 1,12-बेंज़पेरिलीन की तीव्रता

406.3 एनएम 403 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर बेंजो (ए) पाइरीन लाइन की तीव्रता से 3 - 5 गुना अधिक थी।

स्पेक्ट्रम को तरंग दैर्ध्य रेंज 401 - 409 एनएम में दो बार दर्ज किया गया है।

403 एनएम पर बेंजो(ए)पाइरीन और 1,12-बेंज़पेरिलीन की विशेषता रेखाओं की तीव्रता

406.3 एनएम (एच| और एच2, क्रमशः) स्पेक्ट्रोग्राम से निर्धारित किए जाते हैं, जो मिलीमीटर में इन यौगिकों की विशेषता रेखाओं की अधिकतम ऊंचाई पर चरम ऊंचाई को मापते हैं। गणना में औसत मान लिया जाता है. बेंजो(ए)पाइरीन लाइन (ईजीडी) की तीव्रता और 1,12-बेंज़पेरिलीन लाइन (ईजी 2), के = //]/// 2 की तीव्रता के अनुपात (के) के गुणांक की गणना करें।

इसके बाद, यह गुणांक बेंजो(ए)पाइरीन (एक्स सेंट) के मानक समाधान के लिए निर्धारित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, 0.02 और 0.04 μg/cm 3 की द्रव्यमान सांद्रता वाले बेंजो (ए) पाइरीन के 3 सेमी 3 मानक समाधान को दो परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। प्रत्येक परखनली में 1,12-बेंज़पेरिलीन की उतनी ही मात्रा डाली जाती है जितनी नमूने के साथ परखनली में डाली जाती है। प्रत्येक समाधान का स्पेक्ट्रा तरंग दैर्ध्य रेंज 401 - 409 एनएम में दो बार दर्ज किया जाता है।

इस मामले में, यह सुनिश्चित करना सुनिश्चित करें कि 401 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर रिकॉर्डर पेन की स्थिति सभी मामलों में समान स्तर पर तय हो।

इसके बाद, 403 एनएम पर बेंजो (ए) पाइरीन और 406.3 एनएम (क्रमशः एसएच और एच 2) पर 1,12-बेंज़पेरिलीन की विशेषता रेखाओं की तीव्रता स्पेक्ट्रोग्राम से निर्धारित की जाती है। गणना में औसत मान लिया जाता है. बेंजो(ए)पाइरीन की प्रत्येक सांद्रता के लिए Kst = H^H2 की गणना करें।

विश्लेषण किए गए समाधान सी, μg/सेमी 3 में बेंजो (ए) पाइरीन की द्रव्यमान सांद्रता की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है:

एस एस एस टी *के/के एस टी, (1)

जहां с st मानक घोल, μg/cm 3 में बेंजो(ए)पाइरीन की सांद्रता है;

K 1,12-बेंज़पेरिलीन के योग के साथ विश्लेषण किए गए समाधान के स्पेक्ट्रोग्राम से पाया गया गुणांक है;

K C1 1,12-बेंज़पेरिलीन के योग के साथ बेंजो (ए) पाइरीन के एक मानक समाधान के स्पेक्ट्रोग्राम से पाया गया गुणांक है, जिसका मूल्य 1 के संगत जोड़ के साथ विश्लेषण किए गए समाधान के गुणांक के मूल्य के करीब है। ,12-बेंज़पेरिलीन।

दो समानांतर निर्धारण किए जाते हैं और साथ ही प्रक्रिया के अनुसार सभी अभिकर्मकों का उपयोग करके विश्लेषण के सभी चरणों के माध्यम से एक नियंत्रण प्रयोग किया जाता है, लेकिन उत्पाद का वजन किए बिना।

4.4 प्रसंस्करण परिणाम

बेंजो (ए) पाइरीन एल), %, एक्स और एक्स 2, मिलीग्राम/किग्रा का द्रव्यमान अंश, सूत्रों का उपयोग करके गणना की जाती है:

= (एस - एर) ■एम एल वी ■ 100 = (एस - एर) ■ टी 1 ■ वी (2)

3 टी 2 ■ टी ■ 1000 ■ 1000 टी 2 ■ टी '

_ (एस - एस 0) ■ वी ■ टी 1 (3)

जहां c बेंजो (ए) पाइरीन की सांद्रता है, जो 4.3.1, μg/cm 3 के अनुसार प्राप्त विश्लेषण किए गए उत्पाद के समाधान (अर्क) में 4.3.2 या 4.3.3 के अनुसार स्थापित किया गया है; सी 0 - 4.3.1, μg/सेमी 3 के अनुसार प्राप्त नियंत्रण प्रयोग के समाधान में बेंजो (ए) पाइरीन की एकाग्रता; वी विश्लेषण किए गए उत्पाद नमूने से अलग किए गए बेंजो (ए) पाइरीन समाधान की मात्रा है, सेमी 3;

/“मैं विश्लेषण किए गए उत्पाद से पृथक अर्क का द्रव्यमान है, जी; टी 2 प्लेट की एक चौड़ी पट्टी पर लगाए गए अर्क का द्रव्यमान है, जी; t उत्पाद के नमूने का द्रव्यमान है, g.

परिणाम को दूसरे महत्वपूर्ण अंक तक पूर्णांकित किया गया है।

समान संख्या में महत्वपूर्ण अंकों वाले दो समानांतर निर्धारणों का अंकगणितीय माध्य निर्धारण के अंतिम परिणाम के रूप में लिया जाता है।

यदि समानांतर निर्धारण के परिणामों के बीच विसंगति |ए) - एक्स 2\ से अधिक नहीं है<

< 0,01яЖ, где Xi, Х 2 и X- результаты первого и второго параллельных определений и их среднеарифметическое, a d- норматив контроля сходимости, то среднеарифметическое X принимают за результат анализа. В противном случае анализ повторяют. Значение норматива контроля сходимости d приведено в таблице 1.

विश्लेषण एक्स के प्राप्त परिणाम और तालिका 1 में दिए गए सापेक्ष त्रुटि डी के मूल्य के आधार पर, पूर्ण त्रुटि ए = 0. (एसडी मिलीग्राम/किग्रा या%) की गणना की जाती है।

विश्लेषण का परिणाम (X ± A), mg/kg या % P = 0.95 पर प्रस्तुत किया गया है।

4.5 विश्लेषण परिणामों की सटीकता की निगरानी करना

विश्लेषण परिणामों की गुणवत्ता के आंतरिक परिचालन नियंत्रण (आईओसी) में विश्लेषण परिणामों के अभिसरण, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता और सटीकता का नियंत्रण शामिल है।

4.5.1 प्रत्येक विश्लेषण किए गए नमूने के लिए समानांतर निर्धारण का अभिसरण 4.4 के अनुसार नियंत्रित किया जाता है।

4.5.2 आंतरिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता नियंत्रण करने के लिए, कार्यशील नमूनों का उपयोग किया जाता है। नमूने को दो समान भागों में विभाजित किया जाता है और अलग-अलग प्रयोगशालाओं में या एक ही प्रयोगशाला में पद्धति के अनुसार विश्लेषण किया जाता है, विश्लेषण की स्थितियों को यथासंभव अलग-अलग किया जाता है, यानी, वॉल्यूमेट्रिक ग्लासवेयर के विभिन्न सेटों का उपयोग किया जाता है, विश्लेषण अलग-अलग दिनों में किया जाता है या दो अलग-अलग विश्लेषकों द्वारा।

नियंत्रण विश्लेषण की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता को संतोषजनक माना जाता है यदि \X^ - X 2\<

< 0,01 DX, где X/, Х 2 и X- результаты анализа одной и той же пробы, полученные в разных лабораториях или при варьирующих условиях в одной лаборатории и их среднеарифметическое значение, D - значение норматива внутреннего оперативного контроля воспроизводимости. Значение норматива D приведено в таблице 1.

गोस्ट आर 51650-2000

प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता नियंत्रण की आवृत्ति हर दो सप्ताह में कम से कम एक बार होती है।

तालिका 1 - माप सीमा, सापेक्ष त्रुटि विशेषता का मान और पी = 0.95 की आत्मविश्वास संभावना के साथ सापेक्ष त्रुटि (पुनरुत्पादन और पुनरुत्पादन) के यादृच्छिक घटक के परिचालन नियंत्रण के लिए मानक

4.5.3 सटीकता को नियंत्रित करने के लिए, बेंजो(ए)पाइरीन के ज्ञात योग के साथ कार्यशील नमूनों का उपयोग करें। नमूने को दो बराबर भागों में विभाजित किया गया है, जिनमें से एक का विश्लेषण प्रक्रिया के अनुसार किया जाता है; दूसरे में, बेंजो (ए) पाइरीन का एक ज्ञात योजक पेश किया जाता है और फिर प्रक्रिया के अनुसार विश्लेषण भी किया जाता है। विश्लेषण किए गए नमूने में एडिटिव की मात्रा बेंजोपाइरीन सामग्री का 50 - 150% होनी चाहिए।

नियंत्रण विश्लेषण की सटीकता संतोषजनक मानी जाती है यदि \Xy-X-c\< 0,01 К, где Ху, Xи с - результаты контрольных анализов пробы с добавкой бенз(а)пирена, реальной пробы и величина добавки бенз(а)пирена, соответственно; К- норматив оперативного контроля точности. Норматив оперативного контроля точности рассчитывают по формулам: при проведении внутрилабораторного контроля (Р = 0,90)

के= 0.84 वी (ए एक्स]) 2 + (ए एक्स) 2; (4)

बाहरी नियंत्रण के दौरान (पी = 0.95)

के = वी (ए^) 2 + (ए जेड) 2 , (5)

जहाँ A^ + A x द्रव्यमान सांद्रता के अनुरूप त्रुटि विशेषता के मान हैं

एडिटिव के साथ नमूने में और वास्तविक नमूने में बेंजो (ए) पाइरीन;

Ау, = 0.01 Xu और А x = 0.01d x

और वास्तविक नमूने में, % या mg/kg।

सापेक्ष त्रुटि मान d x (8y) तालिका 1 में दिए गए हैं।

विश्लेषण की सटीकता की निगरानी महीने में कम से कम एक बार की जाती है, साथ ही अभिकर्मकों को बदलते समय या काम में लंबे ब्रेक के बाद भी की जाती है।

यदि परिचालन सटीकता नियंत्रण के मानकों को पार कर लिया जाता है, तो दोबारा विश्लेषण किया जाता है। यदि निर्दिष्ट मानकों को फिर से पार किया जाता है, तो विश्लेषण निलंबित कर दिया जाता है, असंतोषजनक परिणामों के कारणों को स्पष्ट किया जाता है, और उन्हें समाप्त कर दिया जाता है।

EQA के परिणाम एक विशेष जर्नल में दर्ज किए जाते हैं।

कमरे के तापमान पर उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी और स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री के 5 तरीके

विधि का सार बेंजो (ए) पाइरीन सहित हाइड्रोकार्बन का निष्कर्षण है, पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड के अल्कोहल समाधान के साथ पूर्व-उपचारित उत्पाद से हेक्सेन के साथ, बेंजो (ए) पाइरीन युक्त पॉलीसाइक्लिक सुगंधित हाइड्रोकार्बन के अंश को अलग करना, शुद्धिकरण सेफैडेक्स के साथ एक स्तंभ पर और एसिटिलेटेड सेलूलोज़ की एक पतली परत में अशुद्धियों के हस्तक्षेप से परिणामी अंश का, इसके बाद कमरे के तापमान पर उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी या स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री द्वारा पृथक बेंजो (ए) पाइरीन का मात्रात्मक निर्धारण किया जाता है।

उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी विधि और कमरे के तापमान पर स्पेक्ट्रोफ्लोरिमेट्री विधि का उपयोग करके विश्लेषण किए गए उत्पादों में बेंजो (ए) पाइरीन के द्रव्यमान अंश के निर्धारित मूल्यों की सीमा 0.0001-0.002 मिलीग्राम / किग्रा या 0.1 x 10 -7 है - 2.0 x 10 -7%। उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी विधि का उपयोग करके समाधान में बेंजो (ए) पाइरीन की निर्धारित द्रव्यमान सांद्रता की इष्टतम सीमा 0.01-0.02 μg/cm 3 है, स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्री विधि का उपयोग करते समय - 0.02-0.2 μg/cm 3।